Evaluación de una mezcla de proteínas solubles de Leishmania brazilensis, utilizada como antígeno sensibilizante de placa para la técnica de ELISA.

GIL, J.; CIMINO, R.; LÓPEZ QUIROGA, I.; ZACCA, R.; NASSER, J.

Salta. Argentina.

Jornada; XXII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán.; 2005

Asociación de Biología de Tucumán.

Los protozoarios del género Leishmania spp., producen la enfermedad denominada leishmaniasis. Existen distintas formas clínicas: cutánea local (LCL), cutánea difusa (LCD), mucocutáneas (LMC) e infecciones viscerales (LV) de diferentes grados. LCL,  LCD y LMC predominan en el norte de la provincia de Salta. Esta infección, que ha superado los 4.000 casos en la provincia de Salta,  se determina por evidencias clínicas, (presencia de lesiones típicas), por medio de la intradermorreacción de Montenegro (IRM), o por detección directa utilizando tinciones especiales del material procedente de la lesión. El diagnóstico también se realiza practicando cultivos de biopsias o por inoculación en hámster. Todas estas técnicas requieren de demasiado tiempo para ser llevadas a cabo en el laboratorio clínico. Una prueba serológica como ELISA representa una alternativa que puede utilizarse como tamizaje serológico. El objetivo de este trabajo fue determinar la sensibilidad y especificidad de una mezcla de proteínas solubles de parásitos de Leishmania brasilensis (cepa DM) (HPL). utilizando la técnica de ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Se analizó un total de 199 sueros de humanos con infección Leishmaniásica demostrada por IRM y/o frotis, 41 sueros de personas de la capital de la provincia, zona no  endémica, con lo que se asume que no padecen la infección, y 4 sueros de pacientes con infección por toxoplasmosis. La técnica de ELISA se normatizó utilizando como antígeno sensibilizante de placa  el HPL  a razón de 2µg/pocillo; dilución de suero 1:20, anti IgG de cabra marcada con peroxidasa. La reacción fue revelada con tetrametilbenzidina en presencia del sustrato específico (H2O2) y se detuvo con H2SO4 (2N). La placa se leyó en un lector de microplacas Metrolab a 450 nm. Los datos fueron analizados a través del programa estadístico EPIDAT 2.0. De los 199 pacientes Leishmaniásicos, 183 evidenciaron reacción positiva, y el 8,04% fueron negativos. En el caso de los sueros de personas de la capital de Salta, 37 dieron reacción negativa mientras que el 10 % (4/41) presentó reacción positiva. Todos los sueros de pacientes con infección por toxoplasmosis fueron no reactivos (4/4). La sensibilidad obtenida fue del 92 % (IC 95%: 87 %-95 %) y la especificidad del 91 % (IC 95 %: 78%-97%). Los resultados obtenidos para la sensibilidad sugieren que, esta mezcla de proteínas solubles de Leishmania brasilensis es adecuada para el diagnostico de la infección Leishmaniásica. Ahora bien, la especificidad obtenida en este estudio, no tiene en cuenta la cruza de reacción con la infección chagásica. En otros trabajos hemos demostrado que HPL evidencia cruza de reacción del 90,6% al ser enfrentado con sueros de pacientes chagásicos, así, su especificidad se ve reducida a un 57 %. Por ello el diagnostico serológico por este medio debe ser acompañado por pruebas especificas de diagnostico para Chagas, evitando diagnósticos erróneos. Además, HPL podría utilizarse en el seguimiento del tratamiento de la infección Leishmaniásica. Financiado por el CIUNSa y por Laboratorios Wiener.