INVESTIGADORES
ROMANUTTI Carina
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de las secuencias del gen de la VP1 de cepas locales de Parvovirus Canino.
Autor/es:
GALLO CALDERÓN MARINA; ROMANUTTI CARINA; KELLER LETICIA; GRIPPO VANINA; LA TORRE JOSE
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología - XIV Congreso Argentino de Microbiología; 2016
Institución organizadora:
ALAM - AAM
Resumen:
Introducción: el Parvovirus Canino (PVC) es un virus altamente contagioso, que provoca gastroenteritis hemorrágicas severas en cachorros, con altas tasas de morbilidad y mortalidad. Es un virus no envuelto, con estructura icosaédrica, y su genoma a ADN monocatenario, es de aproximadamente 5200 nucleótidos, y de polaridad negativa. El mismo, codifica para 2 proteínas estructurales (VP1 y VP2) y 2 proteínas no estructurales (NS1 y NS2). El 90% de la proteína de la capside es VP2 y un 10% es VP1 la cual contiene la secuencia completa de VP2 y 143 aminoácidos únicos en el extremo N terminal. Desde su primer aislamiento en 1978, el PVC ha sufrido cambios antigénicos. Las variantes PVC-2a, PVC-2b, y PVC-2c reemplazaron secuencialmente a la cepa original PVC-2 (presente en la mayoría de las vacunas comerciales). Estas variantes se han descripto en relación a cambios aminoacídicos en la proteína de la cápside VP2; con respecto a la cepa original PVC-2. En trabajos previos, hemos analizado las secuencias de la VP2 y reportado la presencia de las 3 variantes antigénicas en nuestro país, pero poco se conoce acerca de las secuencias de la proteína VP1 y de hecho, no existen reportes de secuencias de estas proteínas en nuestro país. El objetivo del presente trabajo, fue clonar, secuenciar y analizar las secuencias de los genes completos de las proteínas VP1 de cepas Argentinas de PVC.Materiales y Métodos: a partir de hisopados rectales tomados de 2 perros con sintomatología clínica compatible con PVC, se extrajo el ADN. Las muestras fueron acompañadas de un formulario con información referida al animal tal como: sintomatología, historial de vacunaciones, sexo, edad, etc. Para el diagnóstico molecular, se amplificó por PCR, un fragmento de 583 pares de bases (pb) del gen de la VP2. Además, se amplificaron por PCR los genes completos de las proteínas VP1. Los fragmentos obtenidos, fueron clonados en PgemT easy vector y secuenciados por Macrogen Inc (Corea). Las secuencias obtenidas, se analizaron y alinearon utilizando el programa Clustal W.Resultados: El alineamiento a nivel aminoacídico, de las dos secuencias de cepas locales, mostró una identidad del 100%, en los 143 aminoacidos exclusivos de la región amino terminal del gen de la VP1. También, se vio que existe un porcentaje de identidad ≥ 98.9% de la cepas Argentinas (PVC-2c) con respecto a la cepa vacunal (PVC-2).Conclusiones: En este trabajo, se analizaron por primera vez en Argentina, las secuencias de los genes completos de la VP1 de PVC.