Citotoxicidad sobre Artemia salina de aceites esenciales recolectados en la República Argentina

OLIVA, M.; SORIA, Y.; SABINI, L.; ZYGADLO, J.; DEMO, M.

Congreso; XIII Congreso Italo-Americano di Etnomedicina ?Paolo Ceccherelli?; 2004

Citotoxicidad sobre Artemia salina de aceites esenciales recolectados en la república Argentina Oliva M.1, Soria Y.1, Sabini L.1, Zygadlo J.2 y Demo M.1 1Departamento de Microbiología e Inmunología. Fac. Cs Ex. Fco-Qcas y Naturales. UNRC. Córdoba, Argentina.2Departamento de Química, Cátedra de Química. Org y Prod. Naturales. Fac. Cs Ex, Fcas y Naturales. UNC Córdoba, ArgentinaEmail: mdemo@exa.unrc.edu.ar Artemia salina es un crustaceo fácil de cultivar en los laboratorios. Los ensayos realizados con este organismo pueden ser considerados útiles y confiables para estudios de toxicidad de sustancias con distintos efectos biológicos. A pesar de que la citotoxicidad evaluada sobre A.salina puede coincidir con los resultados obtenidos sobre células de mamíferos, no siempre se puede correlacionar el grado de toxicidad entre los dos sistemas. (1, 2). Sin embargo resulta útil para aproximar concentraciones no citotóxicas de trabajo para sistemas celulares de mamíferos. Siguiendo la metodología descripta por Fransen et al, 1997, se realizó el análisis de citotoxicidad sobre Artemia salina, a aceites esenciales (AE) extraídos de las siguientes especies vegetales, autóctonas de Argentina: Aloysia polystachia, Aloysia triphylla, Anemia tomentosa, Bacharys spartoides, Chenopodium ambrosoides, Hyptis mutabilis, Lantana xenica, Mintostachys verticillata, Myrcianthes pseudo-mato, Ophyosporus charrua, Schinus patagonicus y Schinus poligamus. El ensayo consistió en dejar eclosionar durante 24-36 h huevos del crustáceo en un vaso de precipitado conteniendo una solución de sal marina al 3,3% a 20-25ºC, luego de la eclosión las larvas se trasvasaron a una placa de Petri. En placas de 24 pozos se agregaron 30-40 larvas en 1000 l de agua marina y 1% de las diluciones de AE a probar. Se realizaron diluciones factor 2 de los mismos en dimetilsulfóxido (DMSO) a su concentración no citotóxica determinada previamente (1/200). Se incubaron las placas a temperatura ambiente durante 24 horas y se determinó el número de larvas utilizando una lupa. Se contó el número de larvas muertas y luego se dejaron las placas durante 12 horas a -20ºC para realizar el recuento de larvas totales y determinar así el porcentaje de mortalidad (relación entre el número de larvas muertas con respecto al número de larvas totales). Luego se determinó la dosis letal 50 (DL50) y la Máxima Concentración Tolerada (MCT) utilizando el método estadístico de Finney´s. Se tomó como valores no tóxicos la DL50 a concentraciones mayores de 1000 g/ml, (1, 3, 4).Según los resultados expresados en la Tabla 1, se deduce que las especies no tóxicas para A. salina fueron: A.polystachia presentando un valor de DL50 de 6459 g/ml, seguida por M. verticillata (DL50: 1848 g/ml), A.triphylla (DL50: 1279 g/ml) y S. poligamus (DL50: 1179 g/ml). Los aceites esenciales más tóxicos fueron los de B. spartoides y H. mutabilis, debido a que solo se necesitó una concentración de 30 g/ml y de 14 g/ml respectivamente para matar al 50% de las larvas de Artemia. Cabe destacar que A. polistachya no resultó tóxica incluso a la MCT (3530 g/ml), por lo que este aceite merece estudiarse exhaustivamente a fin de ser aplicado como fitofármaco. Tabla 1. Dosis letal 50 (DL50) y máxima concentración tolerada (MCT) de aceites esenciales Aceite esencial DL50 g/ml MCT g/ml A. polystachia 6459 3530 A. triphylla 1279 710 A. tomentosa 968 392 C. ambrosoides 351 34 H. mutabilis 30 0 L. xenica 995 0 M. verticillata 1848 873 M. pseudomato 121 20 O. charrua 972 72 B. spartoides 14 0 S. patagonicus 450 10 S. poligamus 1179 174