Inhibición de estadíos tempranos en el ciclo de replicación de virus Herpes suis tipo I por extracto etanólico de Minthostachys verticillata

ZANON, S., SABINI, L., DEMO, M., ZABALA, E., SUTIL, S., TORRES, C., OLIVA, M.

Congreso; XI Congreso Italo-Latinoamericano de Etnomedicina ?Alberto di Capua?; 2002

INHIBICIÓN DE ESTADÍOS TEMPRANOS EN EL CICLO DE REPLICACIÓN DE VIRUS HERPES SUIS TIPO 1 POR EXTRACTO ETANÓLICO DE MINTOSTHACHYS VERTICILLATA Zanon, S.; Sabini, Liliana; Demo, M.; Zabala, E.; Sutil, S.; Torres, c.; Oliva M. DplO Microbiología e lnmunología, Universidad Nacional de Río Cuarto, Córdoba - Argentina.           e-mail: szanon@exa.unrc.edu.ar Minloslhachys verlicillala es una planta aromática con propiedades medicinales, abundante en la provincia de Córdoba, República Argentina. Numerosos ensayos demostraron que los extractos etanólicos crudos (EEC) obtenidos a partir de hojas tiernas y talluelos ejercen marcada acción antiviral in vitro frente a virus Herpes (Sommaro el al, 2000). Es de particular importancia dilucidar en qué etapa de la replicación del virus ejerce esa acción, para definir, molecularmente, su bioactividad. Células Vero crecidas en policubetas fueron infectadas con 1 x 105 UFP/ml de Herpes suis tipo I Luego de 90 minutos de adsorción, el remanente vira! fue descartado y las monocapas celulares fueron bañadas con Medio de Mantenimiento (MM): Medio Eagle Earle suplementado con 2% de suero fetal bovino, 30 uglml de glutamina, 100 UI de penicilina y 30 mglml de sulfato de estreptomicina. Luego de la adsorción viral, a distintos tiempos (O, 30 minutos, 4,5 y 8,5 horas) se incorporó al sistema el EEC, a concentración no citotóxica (l mg/ml) previamente determinada en el mismo sistema celular. El control del ensayo incluyó monocapas celulares infectadas y bañadas con M:M carente del EEC. Para todos los tratamientos, los sistemas celulares fueron incubados por 24 horas a 37°C. Después de dos ciclos de congelamiento y descongelamiento al sobrenadante obtenido se le determinó el titulo viral por placas de lisis. Los resultados obtenidos para lostíempos mencionados, expresados en porcentajes de inhibición de la producción viral fueron de 99. 1, 73.53, 91.47 Y 99.41, respectivamente. Puede notarse que a tiempo O los títulos virales decayeron significamente corroborando la acción antiviral del EEC ya demostrada. Mientras que a los 30 minutos hubo sólo un 27% de producción viral especulánd´ose que a ese tiempo la célula estaría ocupada intemalizando y descapsidando las particulas. virales y por ello no disponible para internalizar la suficiente cantidad de moléculas del extracto para ejercer una mayor capacidad inhibitoria. El aumento de inhibición de la producción viral a tiempos posteriores reafirman esta hipótesis pues una vez penetrada y desnudada la partícula viral, la célula estaría nuevamente disponible para internalizar el extracto. La adición del EEC a 8,5 h generó una marcada actividad antiviral, momento que coincide con la expresión de genes tempranos retardados en el ciclo normal de producción de viriones´hijos (Fenner el al, 1974). Se especula que el EEC de M. verlicillala ejerce acción antiviral en estad íos tempranos de la replicación viral, modificando probablemente la transcripción de los RNAm virales tempranas retardados y/o traducción de proteínas. Estudios que incluyan drogas que selectivamente ejerzan esta acción (Actinomicina D y Cícloheximida) permitirán definir con más presición molecular el blanco específico de acción del EEC aqui. ensayado. Bibliografii:1: l. Fenner et al. The Biology of Animal Viruses. Second Edition. Academic Press. ] 974. 2. C.Sommaro et al. Rev. XV Congreso Latinoamer. de Microbiología y XXXI Congreso Nac de      Microbiología., México, 2000, pág. 557.