Actividad Antimicrobiana e Identificación de los Componentes del Aceite Esencial de Minthostachys verticillata (Griseb) Epling.

V. PRIMO; M. OLIVA; M. ROVERA; J. DAGHERO; G. IMBERTI; MATTEODA,S; M, DEMO

Merida, Jucatan, Mexico

Congreso; XV Congreso Latinoamericano de Microbiología. XXXI Congreso Nacional de Microbiología; 2000

         MiMB10           Actividad antimicrobiana e identificación de los componentes del aceite esencial de Minthostachys verticillata (Griseb.) Epling. Primo, V.; Oliva, M.; Rovera, M.; Daghero,J.; Imberti, G.; Matteoda, S., Demo, M. Dpto. de Microbiología e Inmunología, Fac. de Cs. Ex. Fco-Qcas y Nat. UNRC. Río Cuarto Argentina. Ruta 36, km 601. Fax: 54-358-4676224. E-mail: valeriaprimo@arnetcpnU_J: Palabras claves: actividad antibacteriana, aceite esencial, sustancias naturales . au,a .. .. """M´" -- --.. oo..... un Microorg.. AE EE EPH CIM CIM CIM S. aureus 5,0 11,5 5.75 B. cereus 5,0 11,5 S.75 P. mirahilis 10,0 E. coli 5,0 _Las plantas poseen la habilidad de sintetizar compuestos aromáticos. En muchos casos estas sustancias constituyen mecanismos de defensa para la planta contra microorganismos patógenos. Entre ellos se encuentran los componentes del aceite esencial con reconocidas propiedades biológicas tajes como la acción antimicrobiana de los terpenoides frente a bacterias, virus y protozoos (1). Minthostachys verticil/ata es una especie aromática, de uso tradicional en medicina folclórica, perteneciente a la familia Lamiaceae. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la actividad antibacteriana del extracto etanólico, del aceite esencial. de la fracción etanólica libre de aceite esencial de M verticillata y determinar C1M de cada una de las muestras. Materiales         y                           métodos:                           Cepas                           bacterianas: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Klebsiella spp. Bacillus cereus y Staphylococcus aureus, obtenidas del cepario de la UNRC. Preparación de las muestras: a. Extracto ctanólico (EE): se realizó una extracción con etanol al 80% de la parte aérea de la planta. Se dejó evaporár y el residuo seco se resuspendió en solución salina (2). b. Aceite esencial (AE): al material vegetal pulverizado se lo sometió al proceso de hidrodestilación durante 3 h. (3). c. Fracción etanólica libre de aceite esencial (EPH}: fracción vegetal remanente de la hidrodestilación. Cromatografia gaseosa (GC): se utilizó un cromatógrafo de gases Hewlett-Packard mod.5890, equipado con detector de ionización de llamas (FID.Tde´ec.350°C) , integrador HP-3396 y una columna HP-INNOW AX (30m x O.25mm x 0,25¡.¡m). Se utilizó como gas transportador N2 con una velocidad de flujo de 1 mVmin. La identificación de los principales componentes se realizó por comparación de los tiempos de retención de éstos con los componentes puros inyectados´ en las mismas condiciones (3). Técnica de difusión en pozo: en agar Mueller-Hinton se sembró una alícuota con 106 células/mi, luego se practicaron orificios a los que se agregó 50 ¡.¡I de c/u de las muestras. Se incubó a 37°C durante 24hs y se observó el halo de inhibición (4 ).Determinación de CIM: se determinaron los valores de CIM utilizando el método de macrodilución en caldo (5). Las muestras se ensayaron en Wl rango de concentración de O-lOmglml para el AE, y entre 0­11.5 mglrnl para las dos muestras restantes. Resultados: Las tres muestras ensayadas (AE, EE, EPH) presentaron actividad antibacteriana frente a S. allreus y B. cereus. Todas las bacterias Gram - fueron inhibidas solamente por el AE, excepto P. aeruginosa. a 4 6 Los valores de CIM expresados en mglml fueron: ,. Como resultado dc la ludrodcstdación dc M verticillata se obtuvo un aceite de color amarillo pálido con Wl rendimiento de 4,54% /p. cuya densidad aproximada fue de 0,90 g/cm´ Sc logró identificar por GC el 87,48% de los componentes, siendo Pulegona (44,56%) y Mentona (3lJ.5l ´Yo) los compuestos mayoritarios, y en menor proporción Limoneno (2,03%), f)-Pineno (0,76%). (J.-Pineno (0,62%) y Cineole (.0,11 %). Discusión y conclusiones: El AE mostró capacidad inhibitoria frente a todas las especies baclcrianas ensayadas Gram + y Gram- excepto P. aeru,I!,II´/O.m. Estos resultados son comparables con los discutidos por Harkenthal et al (6). Es de destacar que ni el extracto etanólico, ni la fracción remanente de la hidrodestilación mostraron actividad antibacteriana frente a las especies Gram - estudiadas Esto sugiere el posible rol antimicrobiano de los terpenoides que se encuentran                           mayoritariamente  en                           el                           AE                         y prácticamente ausentes en las demás fracciones (1). Respecto a las bacterias Gram +, todas las fraccioncs del vegetal ejercieron acción inlubitoria, sugIrIendo que la actividad antimicrobiana está mediada por más de Wl compuesto fitoquímico en este caso De la cromatografia gaseosa se obtuvo que la Pulegona y Mentona son los compuestos mayoritarios del AE. Estudios futuros nos permitirán conocer si tales sustancias puras poseen efectividad comparable con las drogas de uso actual. Bibliografía 1. Cowan. M.. 1999. Clinical Microbiolog) Revie´s. 12 (4): 564-582. 2. Vanden Berghe et al. 1986. Bull. Inst. Paslcur. 84: 101-147. 3. De Feo, V. et al. 1998. Essent. Oil Res. 1 () (j l-ó5. 4.Tiziana-Baratta, M et- al. 1998. Flavour and Fragance Joumal. 13: 235-244. 5. Lennette, E. et al. 1987. Manual de Microbilogía Clínica. pp: 1209. 6. Harkenthal, M. et al. 1999. Pharmazie. 54 4(JO-461