Cambios morfológicos inducidos por swainsonina en cultivos primarios de glía.

PISTÁN M; BUSTILLO S; TORRES ANA M; HERNANDEZ D; CHOLICH, L

San Luis

Congreso; V Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental (SAFE); 2018

Swainsonina (SW) es un alcaloide aislado desde varias especies de Astragalus, Ipomoea y Sida, todas estas plantas están distribuidas en distintas regiones de Argentina. La ingestión crónica por parte del ganado ocasiona severos disturbios neuronales. SW inhibe a la α-manosidasa lisosomal, lo cual provoca alteración de la función y muerte celular. Las células gliales tienen un papel muy importante en el funcionamiento del SNC. Como consecuencia del daño neuronal, estas células tienen la capacidad de responder con cambios morfológicos o funcionales. El objetivo del trabajo fue desarrollar un cultivo primario de células gliales y evaluar los cambios citotóxicos inducidos por SW. Se utilizaron cerebros de ratones de 2 días de vida (Balb/c). Las meninges fueron extraídas e inmediatamente se realizó una disociación mecánica del tejido. Las células se sembraron en placas de 6 pocillos, previamente tratadas con Poly-d-lisina, en un medio DMEM-F12, suplementado con 10% SFB, MEM NEAA, L-glutamina y antibióticos, incubándose en atmósfera húmeda a 37°C y 5% CO2. A los 15 días in vitro, las células fueron expuestas a SW (25 y 50 Mm) por 48 h. Se analizaron cualitativamente por microscopía de contraste de fase las alteraciones morfológicas y daños celulares inducidos por el tratamiento. En los cultivos sin tratamiento se observaron astrocitos de forma plana y poligonal y la microglía con aspecto redondeado y sin prolongaciones. Sin embargo, cuando se expusieron a SW por 48 h los cambios patológicos que presentaron en general las células gliales fueron, soma tumefacto y con desplazamiento nuclear (25mM), siendo la vacuolización citoplasmática evidente a la dosis más alta (50 mM). Estos resultados demuestran el efecto citotóxico del alcaloide SW sobre cultivos primarios de glia. Futuros estudios permitirán conocer los mecanismos moleculares desencadenados por este principio activo presente en numerosas plantas tóxicas que afectan a los animales en pastoreo.