CARACTERIZACION PARCIAL Y RESPUESTAS A LA SALINIDAD DE LA ACTIVIDAD DE AMINOPEPTIDASA-N EN HEPATOPÁNCREAS DEL CANGREJO CYRTOGRAPSUS ANGULATUS

MICHIELS MARÍA SOLEDAD; DEL VALLE JUANA CRISTINA; LÓPEZ MAÑANES ALEJANDRA ANTONIA

Encuentro; X Encuentro Anual Biólogos en Red; 2015

Universidad Nacional de Mar del Plata

A pesar de su importancia fisiológica, faltan estudios sobre existencia, caracterización y modulación de actividad de N-aminopeptidasa (APN) en hepatopáncreas de cangrejos eurihalinos y sobre ajustes digestivos a nivel bioquímico en relación al estado osmorregulatorio. Objetivo: Determinar la existencia, características bioquímicas y respuesta en relación a hipo/hiper-regulación de APN en hepatopáncreas de C.angulatus. Machos adultos(n=5) se aclimataron 10 días en 35 (caracterización), 10 (hiperregulación) o 40? (hiporregulación) de salinidad (S). Se trabajó con sobrenadante (10000xg 15 min) de homogenato (Tris-HCl 0,1M, pH 7,4) (4 ml x g de tejido-1). La actividad de APN (µmoles x min-1 x mg proteína-1) se cuantificó colorimétricamente por hidrólisis de L-alanina-p-nitroanilida (L-Ala pNA) (curva sustrato: 0,04 a 0,58 mM mM en Tris/HCl 50mM, pH 7,6, 37ºC);(curva de pH: buffer Tris/HCl pH 6,6-9 y Glicina pH 10,0; L-alanina 0,42 mM, 37ºC);curva de temperatura: 4-50°C,L-alanina 0.42 mM, pH 7,6). La actividad de APN se incrementó desde pH 6,6 a 7,6. A pH 8,0 fue un 15% menor que la actividad a pH 7,6. La actividad se incrementó entre los 4° C y 20° C y el mayor valor se observó a 37 ° C. A 45 °C, la actividad fue aproximadamente un 47% menor que la actividad a 37ºC. APN en hepatopáncreas de C. angulatus exhibió una cinética de Michaelis-Menten (Km =0,07 mM). La actividad de APN en hepatopáncreas no fue inhibida por bestatina (13mM-55mM). La actividad de APN en hepatopáncreas de individuos expuestos a 10 S fue un 200% más alta que en individuos expuestos a 35S y la actividad APN en individuos de C .angulatus expuestos a 40 S fue similar a la correspondiente actividad en 35S. Los resultados muestran la existencia de APN en hepatopáncreas de C. angulatus y sugieren su rol en ajustes digestivos a nivel bioquímico en relación al estado osmorregulatorio.