“Respuestas a la salinidad y a dopamina de la actividad de enzimas digestivas clave en hepatopáncreas del cangrejo Cyrtograpsus angulatus”.

MICHIELS, M.S.; DEL VALLE, J.C; LÓPEZ MAÑANES, A,A.

Jornada; XIV Jornadas de la Sociedad Argentina de Biología/Primer Encuentro Rioplatense de Biología; 2012

Faltan estudios sobre características y modulación de enzimas digestivas clave en cangrejos hiper-hiporeguladores. Objetivos: se estudió la existencia y características de actividad de lipasa (Lip) y las respuestas a salinidad y dopamina de Lip y de actividad proteolítica (Prot) en hepatopáncreas de C. angulatus. Métodos: Machos adultos se aclimataron 10 días en 35 ‰ de salinidad (S) (caracterización) o en 35 ‰ (osmoconformacion), 10‰ (hiperregulación) y 40‰ S (hiporregulacion). Se trabajó con sobrenadante (10000xg 15 min) de homogenato (Tris-HCl 0,1M, pH 7,4) (4 ml x g de tejido-1) de hepatopáncreas. Lip (μmoles pNP x min-1 x mg proteína-1) se cuantificó por hidrólisis de p-nitrofenilpalmitato (pNPP) (curvas de sustrato: 0,09-0,9 mM en Tris/HCl 50mM, pH 8,5, 37ºC); de pH: buffers fosfato pH 5,4-6,4; Tris/HCl pH 7,2-8,5; Glicina pH 10,0, pNPP 0,7 mM, 37ºC); de temperatura: 4-45°C, pNPP 0,7 mM, pH 8,5). Prot (unidades de enzima x h-1xmgprot-1) se determinó por hidrólisis de azocaseína (1% p/v) en Tris-HCl, 0,1M, pH 7,5. Resultados: Lip fue máxima a pH 8.5 (59±9) y 37°C (32±8); mostró cinética michaeliana (Km= 0.019 mM). En 10 ‰S, Lip (63±15) y Prot (6±1) fueron 3 y 5 veces mayores que en 35‰. En 40 ‰S Lip fue 3 veces mayor que en 35 ‰; Prot fue similar. Dopamina 10-4 M inhibió (50%) in vivo a Lip en 35 ‰S pero no la afectó en 10 o 40‰S ni afectó a Prot. Los resultados sugieren la existencia de ajustes digestivos y mecanismos de regulación diferenciales en relación al estado osmorregulatorio.