LA EXPRESIÓN DE p19INK4d ES INDUCIDA POR LA RADIACIÓN UV Y DISMINUYE LA APOPTOSIS NEURONAL

CERUTI, J.M; VARONE, C.L; SCASSA, M; CÁNEPA, E.T

Mar del Plata. Argentina.

Congreso; XLVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas (SAIC); 2002

SAIC

El arresto en G1 es la respuesta inmediata ante el daño causado al DNA por algún agente externo o interno. En este trabajo estudiamos la participación de p19INK4d en respuesta a la radiación UV en células de neuroblastoma humano SH-SY5Y. La distribución celular fue analizada por FACS y la proliferación por incorporación de 3H-timidina. Niveles de mRNA y proteínas fueron determinados por Northern e inmunoblots, respectivamente. El mRNA y la proteína p19 se expresan en G1 tardío y mitad de S. Las células irradiadas con luz UV 20 mJ/cm2 presentan un arresto en G1 comparadas con el control sin irradiar (62% contra 44% a las 48 h), un aumento en la población subdiploide (13% vs 3,9% y una expresión aumentada de mRNa y proteína p19 con un máximo a las 24 h. Ninguna de las otras INK4 varía su expresión. La sobrexpresión de p19, por transfección con lipofectamina, en células irradiadas con UV, eleva el arresto en G1 (70% a las 48 h) y disminuye a sólo 5,5% la población subG1. Por el contrario, cuando los niveles endógenos de p19 fueron disminuídos por tratamiento con “antisense”, desparece el arresto en G1 (28% a las 48 h) y hay un importante aumento en la población subG1 (23%). Las características apoptóticas de la población subdiploide fue determinada por fragmentación internucleosomal del DNA. Estos resultados sugieren un papel de p19INK4d, cuya expresión es inducida, en la implementación del arresto en G1 y en la disminución de la apoptosis neuronal ante la injuria al DNA.