Rol de PIP5KIgamma y ARF6 en la exocitosis acrosomal del espermatozoide humano

BELMONTE, SILVIA A; MORALES, ALFONSINA; SUHAIMAN, LAILA; PELLETÁN, LEONARDO; ROGGERO, MARCELO; GUERRERO-GIMENEZ, MARTIN; GINER, FEDERICO

Mendoza

Jornada; XXII Jornadas de Investigación y IV Jornadas de Posgrado de la Universidad Nacional de Cuyo; 2010

Universidad Nacional de Cuyo

La reacción acrosomal (RA) es un requerimiento absoluto para la fertilización del ovocito por el espermatozoide. Es una exocitosis regulada calcio dependiente donde la membrana acrosomal externa y el plasmalema fusionan en múltiples puntos. Este mecanismo secretorio comparte características con otros eventos de exocitosis regulada y por esa razón utilizamos esta célula como modelo para el estudio de diferentes aspectos de la secreción. Recientemente hemos demostrado que la pequeña GTPasa Arf6 interviene en la RA y que regula la quinasa que cataliza la transformación de fosfatidilinositol 4-fosfato (PI4P) en fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2): fosfatidilinositol 4-fosfato 5 quinasa (PI4P5K). Utilizando ensayos funcionales determinamos que la actividad de la PI4P5KIgamma es requerida para que ocurra la exocitosis acrosomal estimulada por calcio. Determinamos la producción de PIP2 con ATP radioactivo y observamos que Arf6 estimula la producción de PIP2. La PI4P5KIgamma recombinante es activa y es regulada por Arf6. Nuestro interés se focaliza en determinar la dinámica de la producción de PIP2 durante la exocitosis acrosomal y el mecanismo molecular por el cual se regula.