Modelo de degeneración retiniana en conejos para evaluar el tratamiento de agentes neuroprotectores

BESSONE CAROLINA; HUGO DIAZ; PALMA SANTIAGO; ALLEMANDI D A.; CARPENTIERI AGATA; QUINTEROS D A

Jornada; ENCUENTRO ANUAL DE LA ASOCIACIÓN DE INVESTIGACIÓN EN VISIÓN Y OFTALMOLOGÍA; 2017

El estrés oxidativo desencadena enfermedades neurodegenerativas, comoglaucoma o degeneración macular. El aumento de las especies reactivas deoxígeno y nitrógeno en las células ganglionares de retina (CGR), causa daño enla estructura y función de los axones que componen elnervio óptico, lo que conlleva a la muerte celular por apoptosis, necrosis oautofagia de CGR. El uso de antioxidantes para la prevención de patologíasneurodegenerativas visuales podría ser una estrategia terapéutica válida. Estudios preliminares mostraron que melatonina (MEL), una neurohormonasintetizada de forma parácrina en la retina, tiene un efecto neuroprotectorantiapoptóticosobre las CGR en cultivo y también posee funciones hipotensoras. Parainvestigar la eficacia neuroprotectora de MEL en RGCs, se desarrolló un modelode degeneración retiniana (MDR) en conejos mediante la administración conjuntade glutamato (GLUT) y L-butionina-S,R-sulfoximina (BSO), que desencadenan laapoptosis por citotoxicidad y estrés oxidativo.Los conejos fueron inyectados intraocularmente con GLUT + BSO a diferentesdosis. Se realizóelectrorretinografía (ERG), para evaluar la función in vivo deCGR ycortes histológicos de retina, para observar que tipo de célulasfueronafectadas. Además, se efectuaron ensayos inmunohistoquímicos usando la técnicaTUNEL, para evaluar el proceso de muerte de lasCGR. Se verificó por análisisestadístico los resultados obtenidos y, finalmente, se incorporó MEL para corroborarsu efecto neuroprotector en el modelo animal.Los resultados mostraron que a altas dosis de oxidantes se produce unamuerte significativa de CGR con disminución de las células de la capasuperficial e intermedia en 48 Hs, mientras que, a bajasdosis, se observó unmenor grado de muerte de CGR en 9 días, sin evidencia significativa dedisminuciónenla función retiniana, según ensayos de ERG.De esta manera,con estos resultados logramosdesarrollar el MDR, utilizando la menor dosis GLUT-BSO, donde observamos unamuerte progresiva de CGR en un mayor intervalo de tiempo de tratamiento.Cuandofue realizado el tratamiento con MEL, observamos una notable reducción en lamuerte por apoptosisde CGR, evidenciando que BSO-GLUT no pudieronejercer su efecto oxidante sobre las células. Estosresultados demuestran que MELposeeun efectoneuroprotector y antiapoptóticoevidenciado por la disminución del dañoporestrés oxidativo cuando es administrado de forma local.El MDR obtenido puede aplicarse para evaluar la función neuroprotectora delagente antioxidante. El efecto neuroprotector de MEL en este modelo, postula aMEL como un agente prometedor para el tratamiento de enfermedadesneurodegenerativas oculares.