Factores secretados por Brucella abortus modulan funciones de fagocitos profesionales.

M. VICTORIA DELPINO; DIEGO COMERCI; RODRIGO SIEIRA; CARLOS A. FOSSATI; PABLO C. BALDI

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; XLX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología.; 2002

Abstract Entre las numerosas estrategias que utilizan las bacterias para la invasión de células blanco y la evasión de los mecanismos de lisis, la secreción de factores de virulencia ocupa un papel central. El operon virB de Brucella codifica un sistema de secreción tipo IV, cuya integridad es esencial para la supervivencia intracelular de la bacteria. Se ha demostrado a través de infecciones in vitro con Brucella abortus y Brucella suis 1330 que las bacterias con mutaciones en VirB no translocan a la vía autofágica y no alcanzan su nicho de replicación en retículo endoplásmico, por lo que finalmente son lisadas. Esto sugiere fuertemente que el operón VirB de Brucella codifica un sistema de secreción tipo IV activo que secreta factores que modulan el tráfico intracelular a conveniencia del patógeno. Células monocíticas humanas THP1 fueron incubadas por 1 hora con los sobrenadantes de cultivo de Brucella abortus (wild type) o de una mutante en el aparato de secreción (virB10 polar), o con medio sin cultivar (control). Luego se las infectó durante 1 h con B. suis 1330, previamente opsonizadas con un anticuerpo monoclonal anti LPS. La multiplicidad de infección fue de 50 bacterias por célula. Al término de la infección se agregó gentamicina para eliminar a las bacterias no fagocitadas. A las 2, 16, 48 y 72 horas post infección, las células fueron lisadas y se plaqueó para determinar el número de unidades formadoras de colonias. En los sobrenadantes se determinó la presencia de nitritos por el método de Griess y TNF-alfa por ELISA. A las 24 y 48 hs. la concentración de nitritos y TNF-alfa fue menor, y el número de unidades formadoras de colonias fue mayor, en las células pretratadas con sobrenadante de Brucella abortus wild type que en las tratadas con la mutante virB10 polar o el medio sin cultivar. Las diferencias no fueron significativas a las 72 horas posinfección. Esto sugiere fuertemente que el operón VirB de Brucella codifica un sistema de secreción tipo IV activo que secreta factores que modulan la supervivencia del patógeno en fagocitos profesionales.