EFECTOS DIRECTOS E INDIRECTOS DE LA INFECCIÓN CON BRUCELLA ABORTUS SOBRE CÉLULAS HUMANAS ENDOTELIALES DE LA MICROVASCULATURA CEREBRAL.

MIRAGLIA M CRUZ; RODRIGUEZ ANA M; DELPINO M VICTORIA; GIAMBARTOLOMEI GUILLERMO H

Congreso; LX REUNION ANUAL Sociedad Argentina de Inmunologia (SAI); 2012

La invasión del sistema nervioso central (SNC) por B. abortus (B.a.) resulta en la patología inflamatoria denominada neurobrucelosis. Demostramos recientemente que B.a. infecta la glia produciendo citoquinas inflamatorias que contribuyen al daño tisular. El SNC se encuentra protegido por la barrera hematoencefálica (BHE), cuyas células endoteliales actúan como filtro entre la circulación general y el SNC. Nuestro objetivo general es determinar la interacción de B.a. con la BHE durante la neurobrucelosis. Para tal fin, investigamos la influencia directa de B.a. sobre células endoteliales de microvasculatura cerebral (HBMEC) mediante la infección a diferentes multiplicidades (MOI) y el efecto indirecto por estimulación con sobrenadantes de células gliales infectadas. Se determinó la producción de citoquinas y quimiocinas, la expresión de moléculas de adhesión y la apoptosis para ambos casos. B.a. se adhiere, infecta y replica en HBMEC de manera MOI dependiente en función del tiempo. Se observaron aumentos significativos en la adherencia y la internalización bacteriana utilizando MOI crecientes (p<0,001 MOI 25 vs 1000). La infección induce la secreción de las citoquinas IL-8 e IL-6 y de la quimiocina MCP-1 (p<0,001 MOI 25 vs 1000). A excepción de la replicación bacteriana intracelular, estos resultados son reproducidos en las cepas rugosa y mutante del sistema de secreción tipo IV. El efecto directo de la infección de B.a. sobre las HBMEC produce un aumento de la expresión basal de la molécula de adhesión CD54, sin embargo no produce secreción de TNF-a ni genera apoptosis. Sin embargo, el aumento de CD54 es significativamente mayor (p<0,01) cuando las HBMEC son estimuladas indirectamente con sobrenadantes de microglia y astrocitos infectados; al igual que aumenta la apoptosis. Nuestros resultados sugieren que el efecto indirecto causado por citoquinas pro-inflamatorias provenientes del ambiente glial contribuirían más eficientemente a la injuria en la BHE en la neurobrucelosis.