Optimización de las condiciones de cultivo del actinomycete AB0 en medio artificial de suelo adicionado con cobre.

ALBARRACÍN V.H.; SALES, A.M.; AMOROSO, M.J.; ABATE,C.M.

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XVII CONGRESO LATINOAMERICANO DE MICROBIOLOGÍA Y X CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGÍA; 2004

Sociedad Argentina de Microbiología

En Tucumán, la contaminación ambiental con cobre se presenta en cursos de aguas y sedimentos donde se vuelcan efluentes industriales provenientes de curtiembres, papeleras, zonas mineras, etc. Se plantea entonces, la necesidad de desarrollar técnicas de biorremediación de menor costo que las existentes y que puedan ser utilizadas in situ ya sea para extraer los metales o para estabilizarlos en formas no tóxicas o menos tóxicas. Los actinomycetes, que constituyen aproximadamente el 90% de la población bacteriana presente en el suelo, juegan un importante rol ecológico reciclando sustancias. Presentan una gran versatilidad metabólica y por ello, resultan de importancia para la biorremediación de suelos. La cepa actinomycete AB0 aislada de sedimentos de un canal contaminado con cobre, demostró tener una captación de cobre del 70 % en cultivos líquidos mínimos adicionados de 34 mg mL-1 de Cu2+. Debido a la potencial capacidad de este microorganismo, es nuestro interés determinar las condiciones óptimas de crecimiento del mismo en medios artificiales que simulan las condiciones del suelo a fin de aplicar estas resultados a experiencias de biorremediación de cobre en suelo. El extracto de suelo fue preparado utilizando muestras del mismo, obtenidas de zonas libres de contaminación con el cual se preparó el medio de cultivo: suelo artificial, en adelante, AS. Posterior a su esterilización se sembró dicho medio con una suspensión de esporos del actinomycete AB0 (1x109 UFE/ml). El extracto de suelo fue analizado con respecto a la composición de nitrógeno total por el método de Kjeldhal y carbono orgánico total  por el método de Walkley-Black. El crecimiento fue evaluado a través del tiempo, determinando la cantidad de biomasa, expresada como peso seco durante 14 días de incubación para determinar las condiciones óptimas de crecimiento de AB0 en AS suplementado con 20 mg mL-1 de Cu2+ y en AS como control. estudiando el efecto de los siguientes parámetros físicos y químicos: pH (5, 6, 7, 8 y 9), simulando extractos de suelos ácidos, neutros y alcalinos y temperatura de incubación (25, 30 y 35 ºC). La determinación de cobre residual en los sobrenadantes se realizó mediante espectrofotometría atómica. La temperatura y el pH son factores que condicionan el crecimiento del actinomycete. Manteniendo el pH 7, el mayor crecimiento se observa a 30ºC, ya que a 35 y a 25 ºC crecen un 20 y un 30 % menos, respectivamente. El crecimiento máximo manteniendo fija la temperatura se obtiene a pH 7, mientras que a pH 5, 6, 8 y 9 crecen un 30, 15, 25, y 40 % menos, respectivamente. El cobre muestra ser tóxico a pH 5, debido a que se observa una inhibición del 50 % en el crecimiento de la cepa AB0 con respecto al control que no contenía cobre. En las demás condiciones no se puede establecer que hay una diferencia significativa en la inhibición del crecimiento por la presencia del cobre. Por todo esto concluimos que las condiciones óptimas de crecimiento para la cepa AB0 en el medio AS son el pH 7 y una temperatura de 30 °C, circunstancias que pueden ser extrapoladas a ensayos de bioremediación en suelos contaminados con cobre a escala laboratorio.