Efectos de inhibidores de las poli-ADP-ribosil-polimerasasTankyrasas en la infección de células VERO por Trypanosoma cruzi Tulahuén (TulII y β-gal Tul clon C4)

VILCHEZ LARREA, SALOMÉ C.; FERNÁNDEZ VILLAMIL, SILVIA H.; LAFON HUGHES, LAURA I.

Montevideo

Congreso; II Congreso Nacional de Biociencias; 2019

La enfermedad de Chagas, causada por Trypanosoma cruzi, es una enfermedad endémica en Latinoamérica estrechamente relacionada con la pobreza. Los fármacos disponibles para su tratamiento presentan baja eficiencia en la etapa crónica y esquemas de administración tediosos. La invasión por T.cruzi (Tc) ocurre por diversos mecanismos que dependen de la cepa involucrada: mientras que Tc-G se asocia a los microfilamentos de la célula huésped, la cepa CL desensambla el citoesqueleto de actina. En concordancia, citocalasina-D inhibe la infección de Tc-G y facilita la de Tc-CL. Además, ante la infección se activan distintas vías de señalización, entre ellas Wnt canónica, involucrando la translocación de β-catenina desde uniones intercelulares/citoplasma, al núcleo.La poli-ADP-ribosilación es una modificación postraduccional de proteínas catalizada por las poli-ADP-ribosil-polimerasas (PARPs), consistente en la adición de poli-ADP-ribosa (PAR). PARP-1, localizada en el núcleo de la célula huésped, y la PARP Tc (Tc-PARP) tienen un rol en el proceso de infección: su inhibición lleva a una disminución de la infección in vitro. Las tankyrasas (TNKS) son PARPs nucleo-citoplásmicas y serían las principales responsables de la síntesis del cinturón epitelial de PAR. Utilizamos la cepa Tc-Tul β-gal, la cual aumenta su infección en presencia de citocalasinaD 2 μM, de manera similar a Tc-CL, y evaluamos mediante ensayo β-galactosidasa los efectos de varios inhibidores de TNKS sobre la infección. La inhibición de TNKS-1 mediante MN64 y FLALL9 en el orden nanomolar llevó a una disminución del ~40% infección con respecto al control, sin alteración del crecimiento de las células huésped. Este efecto puede estar relacionado con la capacidad de las drogas inhibidoras de TNKS1/2 de alterar el citoesqueleto de actina. Además, los inhibidores de TNKS1/2 alteraron la distribución núcleo/citoplasma de βcatenina ante la infección, indicando que estas drogas también podrían ser detrimentales para la infección al afectar la vía Wnt canónica.