Poly(ADP-ribosa) como señal de muerte celular en trypanosoma

MARIANA SCHLESINGER; SALOMÉ VILCHEZ LARREA; MARÍA LAURA KEVORKIAN; MIRTHA M. FLAWIÁ; SILVIA H. FERNÁNDEZ VILLAMIL

Buenos Aires

Otro; XXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Sociedad Argentina de Protozoolgía

Poli(ADP-ribosa)polimerasa es la enzima que cataliza la formación de homopolímeros de ADP-ribosa (PAR),fundamentalmente en respuesta a daños al ADN. El metabolismo de PAR es un proceso dinámico y PARG (PARglicohidrolasa) es la enzima principal en la degradación de dicho polímero. Los tripanosomátidos poseen una única PARP yPARG, cuya localización subcelular es opuesta a la reportada en otras especies. En T. cruzi hemos propuesto que laactivación de PARP juega un rol dual, asistiendo a los mecanismos de reparación cuando el daño es subletal, mientras queen condiciones de daño letal, PAR podría actuar como un mecanismo de switch entre apoptosis y necrosis, dependiendo deltipo de daño genotóxico. Experimentos llevados a cabo con parásitos procíclicos de Trypanosoma brucei silenciados (RNAiTbPARP)indicaron que la falta de TbPARP no altera la tasa de crecimiento en condiciones normales, confirmando lopropuesto por estudios de RIT-seq. Estos parásitos, sin embargo, exhibieron una sensibilidad disminuida a dosis letales deH2O2. Estos resultados sugieren que PAR podría actuar como señal de muerte celular. Para evaluar la importancia de laacumulación de PAR en el núcleo de parásitos expuestos a agentes oxidantes, obtuvimos parásitos procíclicos RNAiTbPARGy sobreexpresantes de TbPARP. Ambos parásitos transgénicos no mostraron alteraciones morfológicas, pero si unadisminución de la tasa de crecimiento y una mayor sensibilidad al agente oxidante. Análisis por citometría de flujo conAnexina V e IP mostraron que, cuando dichos parásitos son sometidos a una dosis letal de H2O2, se induce un patrón demuerte celular diferente a los parásitos silvestres. La clasificación de los distintos tipos de muerte celular es cada vez máscompleja y recientemente se ha reconocido otra forma de muerte celular denominada Parthanatos. Este mecanismocomparte algunas características bioquímicas y morfológicas con otros tipos de muerte celular y se caracteriza por sucedera una rápida activación de PARP con acumulación de PAR en el núcleo. Los resultados sugieren que este tipo de muertecelular podría proceder en tripanosomas.