INVESTIGADORES
BRUN Lucas Ricardo Martin
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación del tejido óseo en ratones knockout de fosfatasa alcalina intestinal.
Autor/es:
CORNEJO ANDORNI A; BRUN LUCAS; VILLARREAL L; LOMBARTE M; MILLÁN JL; RIGALLI A
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XVIII Congreso y la XXXVI Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2016
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Rosario
Resumen:
La fosfatasa alcalina intestinal (FAi) es una enzima de membrana delenterocito que incrementa su actividad en función de la concentración luminalde calcio (Ca). Esto produce una disminución proporcional del pH luminal y conllevaa una disminución de la absorción de Ca. La participación de la FAi en laabsorción de Ca fue confirmada en ratones C57BL/6 deficientes de fosfatasaalcalina duodenal (KO) los cuales mostraron mayor absorción de Ca. Enconsecuencia, el objetivo de este trabajo fue evaluar el tejido óseo en ratonesFAi-KO. Para ello evaluamos el tejido óseo en tibia y fémur de 10 ratones KO y 7controles wildtype (WT) de 4 meses deedad. Los parámetros histomofométricos (porcentaje de tejido óseo trabecular[BV/TV], espesor trabecular y número de trabéculas) y de conectividadtrabecular (índices de conectividad [ICI y NDX] y relación nodo-terminal [R])se evaluaron sobre imágenes digitales (100x) de cortes histológicos de tibiateñidos con H&E. La densidad mineral ósea (DMO, mg/cm2) seevalúo en la tibia en el mismo sector en donde se evaluaron los parámetros histomorfométricos.Para la DMO se utilizó un equipo de rayos X (70 kV) y un patrón de aluminiocalibrado con concentraciones de Ca conocidas. Sobre las radiografías se determinaronparámetros morfométricos como largo y ancho del hueso y espesor cortical. Losensayos biomecánicos se realizaron en fémur a través del ensayo de flexión atres puntos con el cual se evalúa la fuerza de fractura, la fuerza máxima, la rigidezy la energía absorbida del tejido cortical y con el ensayo de fractura delcuello femoral para evaluar tejido trabecular (fuerza de fractura, fuerzamáxima y energía absorbida). Los resultados se expresan como media±EE y fueron analizados empleando t de Student para datos independientesconsiderándose significativo cuando p<0.05. Resultados: Los datosmorfométricos no mostraron diferencias significativas. Tampoco se observarondiferencias en el ensayo de fractura a tres puntos. Sin embargo, el ensayo defractura del cuello femoral, que evalúa tejido trabecular, si mostró mayorfuerza de fractura, fuerza máxima y energía absorbida en los ratones KO. Sibien la DMO (WT= 10.47±3.04; KO=13.30±1.54) y el porcentaje de hueso trabecular (WT= 10.20±1.25%; KO= 14.58±2.59%) nomostraron diferencias significativas, se observó un incremento considerable enlos ratones KO. La relación nodo-terminal fue significativamente mayor en losratones KO (WT= 0.16±0.04; KO= 0.30±0.32; p<0.05). En forma similar pero sin alcanzar significadoestadístico debido a la dispersión de los datos, los parámetros de conectividadtrabecular ICI y NDX fueron mayores en el grupo KO (ICI: WT= 0.09±0.06; KO= 0.18±0.08; NDX:WT= 0.23±0.18; KO= 1.53±0.79).  En conclusión, la mayorcaptación de Ca en los ratones KO conduciría a un mayor porcentaje de huesotrabecular y mayor conectividad entre las trabéculas lo que explicaría lasmejores propiedades biomecánicas observadas.