Evaluación del tejido óseo en ratones knock-out de fosfatasa alcalina intestinal.

BRUN LR; RETAMOZO C; TERJES M; MILLÁN JL; RIGALLI A

Sierra de la Ventana

Congreso; XXXII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral (AAOMM).; 2015

Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral (AAOMM).

Estudiosprevios revelaron que la fosfatasa alcalina intestinal (FAi) aumenta suactividad a medida de que se incrementa la concentración luminal de Ca lo cualconlleva a una disminución en el pH luminal con la consiguiente disminución enla absorción de Ca. Asimismo la absorción de Ca se halló incrementada cuandolos experimentos se realizaron en presencia de L-fenilalanina como inhibidor dela FAi confirmando la participación de la FAi en la regulación de la absorciónde Ca. Además, en ratones deficientesdel gen de fosfatasa alcalina duodenal (Akp3-/-) se demostró que losratones FAi-KO absorben cantidad de Ca por unidad de superficie de absorciónque los ratones controles. Si el mayor calcio absorbido es dirigido al tejidoóseo, este fenómeno debería reflejarse en cambio en los parámetros biomecánicosde este tejido. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue evaluar losparámetros biomecánicos óseos en ratones FAi-KO en comparación con controles wildtype (WT). Para ello se emplearon ratones WT y FAi-KO hembras de 4 mesesde edad los cuales fueron alimentados desde el destete con una dietaconteniendo diferente contenido de Ca (1 o 2 g%) conformándose de esta manera 4grupos experimentales: WT+ Ca 1 g% (n=10); WT + Ca 2 g% (n=10); KO + Ca 1 g% (n=6); y KO + Ca 2 g%(n=7). Los ensayos biomecánicos se realizaron en fémur y llevaron a cabo con uninstrumento con una celda de carga de 3 mV/V y 200 N de capacidad máxima y sensibilidadde 0.01 N. Los valores de voltaje y desplazamiento fueron adquiridos por unsoftware (Biomedical data acquisition suite 1.0). Para la evaluación del tejidocortical se utilizó un ensayo de flexión a tres puntos con el cual seobtuvieron los siguientes parámetros: 1. fuerza de fractura; 2. fuerza máximasoportada; 3. rigidez del hueso; 4. energía absorbida. Para la evaluación deltejido trabecular se posicionó la epífisis próximal del fémur sobre unasuperficie plana el extremo proximal del fémur apoyando la cabeza femoral demanera que la presión ejercida sobre el hueso produzca la fractura a nivel delcuello femoral. Se ejerció sobre éste una fuerza a una velocidad constante de0.012 mm/seg, hasta producir su fractura y se evaluó fuerza de fractura, fuerzamáxima soportada y energía absorbida. Los resultados se expresan como media±EE y se analizaron empleando un análisis de  de la variancia a dos criterio declasificación (ANOVA) considerándose significativo cuando p<0.05. Resultado:A nivel cortical no se observaron diferencias entre los grupos en losdiferentes parámetros evaluados: fuerza de fractura, fuerza máxima, energíaabsorbida y rigidez. La evaluación de la resistencia a nivel del cuello femoralmostró diferencias significativas entre los grupos WT + Ca 1 g% y FAi-KO + Ca 1g% tanto a nivel de la fuerza de fractura (WT + Ca 1 g%: 20.66±1.96 N; FAi-KO + Ca 1 g%: 28.71±1.67 N) como de la fractura máxima soportada (WT + Ca1 g%: 20.67±1.97 N ; FAi-KO + Ca1 g%: 28.78±1.69 N), sindiferencias entre los grupos que recibieron 2 g%. La energía absorbida fuemayor en los grupos KO respecto de los grupos WT. Estos resultados estaríansugiriendo mejores propiedades biomecánicas a nivel del tejido trabecular enlos ratones FAi-KO, posiblemente por mejor calidad del material en lo querefiere a contenido de calcio, lo cual debería confirmarse a través de la realizaciónde  densitometría y estudios histomorfométricosóseos