Entorno genético del gen lnuB en Streptococcus agalactiae

MONTILLA PIEDRAHITA A; ZAVALA A; CACERES R; CITTADINI R; VAY C; GUTKIND G; FAMIGLIETTI A; BONOFIGLIO L; MOLLERACH M

Buenos Aires

Jornada; 157° Jornada Científica: ´´Resistencia bacteriana y uso racional de los antibióticos´´.; 2013

Academia Nacional de Farmacia y Bioquímica

Introducción: La resistencia a lincosamidas en Streptococcus agalactiae es comúnmente mediada por metilasas codificadas por el gen erm, el cual confiere resistencia cruzada a macrólidos, lincosamidas y estreptograminas B. Previamente reportamos la primera detección en Argentina de un aislamiento de esta especie portador del gen lnuB. Durante el periodo de 2007-2012, se recuperaron 8 aislados epidemiológicamente no relacionados de S. agalactiae resistentes a clindamicina pero susceptibles a eritromicina (fenotipo L) en dos hospitales diferentes. El objetivo de este estudio fue determinar el entorno genético del gen lnuB detectado en cepas de S. agalactiae, con el fin de conocer el elemento móvil involucrado en la diseminación de este gen de resistencia poco común. Métodos: Se estudiaron ocho aislados de S. agalactiae con fenotipo L, obtenidos de diferentes sitios anatómicos de pacientes de ambos sexos sin nexo epidemiológico. La concentración inhibitoria mínima (CIM) fue determinada en medio sólido siguiendo las recomendaciones del CLSI. Mediante PCR fueron detectados los genes de resistencia ermB, mef y lnuB. La relación clonal se determinó por electroforesis de campo pulsado (PFGE) utilizando la enzima ApaI. Mediante mapeo por Tail-PCR y secuenciación, se realizó el estudio del entorno del gen lnuB. Results: Los aislamientos fueron susceptibles a eritromicina (CIM =0.01-0.06 mg/L), pero resistentes a clindamicina (CIM = 4-8 mg/L) y todos portaban el gen lnuB, lo cual se confirmó mediante secuenciación. La genotipificación por PFGE reveló un clon único asociado con este fenotipo. El entorno genético del lnuB fue secuenciado en la cepa (SGB76), hallándose un elemento de 10,385 kb con alta identidad nucleotídica a la región correspondiente del plásmido pV7037 de Staphylococcus aureus SA7037 (9698/9717 99%) . Este nuevo elemento que contiene al gen lnuB está flanqueado por una copia de las transposasas IS1216 e ISL3. Conclusiones: Este es el primer reporte que a nuestro criterio describe la estructura del elemento que movilizaría el gen lnuB en S. agalactiae, la presencia de dos secuencias de inserción que flanquean dicha estructura, lo cual sugiere que la diseminación de este gen de resistencia podría ocurrir por transferencia horizontal y posiblemente mediada por este elemento. Serán necesarios estudios posteriores para confirmar esta hipótesis.