Staphylococcus aureus resistente a tigeciclina: cambios en la sensibilidad a otras familias de antibióticos

HERRERA M; POSSE G; MOLLERACH M; DI CONZA J

Buenos Aires

Congreso; VII Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínicas – SADEBAC.; 2012

Asociación Argentina de Microbiología

Los estudios de vigilancia de tigeciclina realizados sobre S. aureus demuestran la buena actividad que sigue manteniendo este antibiótico en esta especie, con altos porcentajes de sensibilidad. Sin embargo, se ha observado una alta capacidad de desarrollar disminución de la sensibilidad in vitro frente a la presión selectiva del antibiótico. Esto podría conllevar a cambios en la sensibilidad frente a otras familias de antibióticos. Objetivos: Analizar el patrón de sensibilidad a diferentes antibióticos utilizados en la práctica clínica en mutantes de S. aureus resistentes a la tigeciclina seleccionadas in vitro y evaluar posibles alteraciones en el crecimiento de las cepas donde se haya observado modificación. Material y Método: Se estudiaron 10 aislamientos clínicos resistentes a la meticilina (mecA positivos). Las mutantes resistentes a tigeciclina fueron obtenidas in vitro a través de pasajes seriados en concentraciones crecientes de este antibiótico. La isogenicidad entre las cepas mutantes y sus respectivas parentales fue explorada mediante electroforesis en campos pulsados (PFGE). Se determinó la sensibilidad a diferentes antibióticos por método de difusión y dilución en medio sólido siguiendo las recomendaciones del CLSI. En las cepas que mostraron cambios en su susceptibilidad a otros antibióticos distintos de tigeciclina se evaluó la velocidad de crecimiento en caldo Mueller Hinton y la frecuencia mutacional por siembra en placas de agar Mueller Hinton conteniendo 100 μg/ml de rifampicina o 4 x CIM de ciprofloxacina. Los ensayos se realizaron por duplicado y se aplicó el test de ANOVA de un factor para establecer asociaciones estadísticas. Resultados: Se obtuvieron 5/10 mutantes resistentes a tigeciclina que tuvieron un aumento en la CIM de este antibiótico entre 32 y 128 veces. Dos de estas cepas mostraron un cambio en la sensibilidad a otras familias de antibióticos. Ambas cepas mostraron ser isogénicas respecto a los aislamientos parentales y presentaron un perfil de bandas de PFGE coincidentes con el clon prevalente asociado a infecciones de inicio en la comunidad. En una de ellas se evidenció una disminución de 8 veces elvalor de la CIM a oxacilina respecto a la cepa parental, pasando de la categoría resistente a sensible, mientras que en la otra cepa se produjo un incremento de 4 veces su valor de CIM a vancomicina respecto a la cepa parental. Al realizar las curvas de crecimiento se observó una velocidad promedio de crecimiento de 0.90/h y 0.70/h para cada una de las cepas parentales y de 0.64/h y 0.56/h para las respectivas mutantes y no se observaron diferencias significa-tivas en las cinéticas de crecimiento al comparar con las respectivas cepas parentales (p>0.10). No hubo aumento de la frecuencia mutacional entre las cepas estudiadas. Conclusión: Durante el proceso de selección in vitro de mutantes resistentes a tigeciclina se producen modificaciones que afectan los valores de sensibilidad a otras familias de antibióticos sin cambio aparente en el fitness del microorganismo. Es necesario realizar estudios que nos permitan explicar a nivel molecular estos cambios de sensibilidad y su posible significado a nivel clínico.