INVESTIGADORES
MOLLERACH Marta Eugenia
congresos y reuniones científicas
Título:
Perfiles proteicos y caracterización de hemolisinas como criterios adicionales de taxonomía del género Listeria.
Autor/es:
PICCA SM; GUTKIND G; MOLLERACH M; VACCARO M; RIEDER ROJAS E; DE TORRES RA
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología; 1985
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
Los resultados obtenidos al aplicar pruebas convencionales de identificación de varias cepas bacterianas de origen humano y animal, identificadas preliminarmente como Listeria monocytogenes, mostraron un apreciable grado de heterogeneidad lo que hizo imprescindible la aplicación de un estudio mas profundo con el fin de lograr una ubicación sistemática cierta en una jerarquía taxonómica determinada. Por ello se decidió encarar el estudio de las proteínas extraíbles en presencia de dodecil-sulfato de sodio (SDS), mediante la realización de electroforesis en gel de poliacrilamida - SDS (SDS-PAGE). Se compraron los perfiles obtenidos para las diferentes cepas, tanto aquellas tipificadas preliminarmente como L. monocytogenes como las de microorganismos taxonómicamente relacionados. Se procedió además al estudio de las hemolisinas producidas por L. monocytogenes con el fin de purificar y caracterizar los diferentes tipos presentes en los sobrenadantes de cultivos en infusión cerebro corazón adicionado de 0.5 de glucosa. La purificación se llevó a cabo mediante cromatografía en Sephadex G-100 en presencia y ausencia de agentes reductores, enfrentándose con glóbulos rojos de carnero o conejo las diferentes fracciones eluídas. Los perfiles proteicos de la cepa prototipo y aquellas con alto nivel de compatibilidad con Listeria monocytogenes en las pruebas bioquímicas convencionales de identificación fueron homólogos; en tanto que en algunas cepas que compartían el reducido número de ensayos que se emplean comunmente para la identificación de Listeria, resultaron netamente diferenciables al igual que los obtenidos con microorganismos de los géneros relacionados. Asimismo, la producción de hemolisinas fue demostrada sólo en todas las cepas que presentaban un perfil proteico compatible con L. monocytogenes, encontrándose relación entre sus pesos moleculares y su sensibilidad o no al oxígeno. El estudio de los perfiles proteicos mediante SDS-PAGE como criterio taxonómico es un método sensillo, específico y rápido que permite la comparación de varios microorganismos en un mismo ensayo, por lo que debería difundirse su empleo como prueba rutinaria en laboratorios con interés taxonómico de base. Por otra parte, proponemos la investigación de la actividad hemolítica de los microorganismos en estas condiciones experimentales (con y sin agregado de agentes reductores), pues de lo contrario se plantea la posibilidad de obtener falsos negativos, tal como demostramos para Listeria innocua, listeria welshimeri y Listeria seeligieri (L. monocytogenes sensu lato) y la cepa prototipo de L. monocytogenes (ATCC 15313 - 29-CCM-A 454).