Purificación y caracterización de Linnocuicina 819

MOLLERACH M; VEGA A

Buenos Aires

Jornada; Primeras Jornadas del Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología; 1990

Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Facultad de Farmcia y Bioquímica

Linnocuicina 819 es una sustancia producida por Listeria innocua con marcados efectos deletéreos sobre otros microorganismos, entre los que se cuenta otra especie del género Listeria (Listeria ivanovii). A partir de extractos parcialmente purificados, se continuó un esquema de purificación incluyendo pasajes por columnas de Sepharosa 68 (donde se obtuvieron tres picos de los cuales solo uno era activo) y por una columna de intercambio iónico (Mono Q - PPL system - Pharmacia), eluyéndose la actividad biológica entre 0.93 y 1.14 M de CINa. Para confirmar el carácter no replicativo de Linnocuicina, se ensayaron los sobrenadantes de células de L. ivanovii mediante la comparación de curvas de muerte en microorganismos sensibles, no observándose ningún aumento de su concentración al tratar los cultivos. Algunas fracciones parcialmente purificadas de esta sustancia se analizaron mediante técnicas de microscopía electrónica, sin que se pudiera observar material compatible con bacteriofagos o fagos defectivos. Por otra parte, se caracterizó preliminarmente el efecto de la Linnocuicina sobre células sensibles, observándose (por microscopía de contraste de fases) una rápida pérdida de la refringencia celular, disminución del número de bacterias y aparición de detritos celulares. Se determinó el efecto de distintas drogas sobre la acción de Linnocuicina en cultivos sensibles.