INVESTIGADORES
VATTA Marcelo Sergio
congresos y reuniones científicas
Título:
Mecanismos implicados en la regulación a corto plazo de la actividad y expresión de Tirosina Hidroxilasa inducida por la endotelina-1 y -3 en Hipotálamo de rata
Autor/es:
PERFUME G; NABHEN S; BATISTONE A; BIANCIOTTI LG; VATTA MS
Lugar:
BUENOS AIRES-ARGENTINA
Reunión:
Congreso; XII CONGRESO LATINOAMERICANO Y 1 IBEROAMERICANO DE CIENCIAS FISIOLOGICAS; 2006
Institución organizadora:
SOCIEDAD ARGENTINA DE FISIOLOGIA
Resumen:
La Tirosina Hidroxilasa (TH) es la enzima limitante de la síntesis de catecolaminas. El principal mecanismo de regulación de la actividad de TH a corto plazo es la fosforilación de sitios Ser específicos. En trabajos previos, observamos que las endotelinas (ETs) disminuyen a corto plazo la actividad de TH  en hipotálamo anterior (HA) y posterior (HP) de rata. Dichos efectos son mediados por el receptor ETB en HA y por un receptor atípico en HP y en ambos casos involucrando la vía del NO/GMPc/PKG. Con el objeto de continuar las investigaciones determinamos otras vías intracelulares involucradas y los niveles de TH total y de los sitios fosforilados(Ser 19,31 y 40). Los experimentos se llevaron a cabo incubando HA y HP de ratas macho Sprague Dawley (200-250 g) durante 30 min. en ausencia o presencia de ETs (10 nM)  y de los inhibidores de las vías intracelulares estudiadas. Se determinó la actividad de TH por método radioenzimático y los niveles de TH total y de los sitios fosforilados por Western Blot. Tanto en HA como en HP, la disminución de la actividad de TH producida por ambas ETs no se bloqueó en presencia de H-89 500nM (inhibidor de PKA) observándose efecto contrario en presencia de U73122 10uM y KN-62 1uM (inhibidores de PLC y CAMKll, respectivamente). Además observamos que las ETs no modifican a corto plazo los niveles de TH total. Sin embargo, las ETs disminuyeron los niveles de pSer19, pSer31 y pSer40. En base a estos resultados, podemos concluir que en HA y HP la disminución a corto plazo de la actividad de TH producida por ETs también involucra la vía de los fosfoinosítidos y a la CAMKll pero no a la vía de la PKA. Esta disminución de actividad enzimática  puede deberse a la observada disminución de los sitios Ser fosforilados lo cual es consecuente a un aumento de la actividad de fosfatasas o a una disminución de la actividad de las quinasas correspondientes.