Evaluación pre-clínica de cannabis medicinal alto en CBD: propiedades anti-tumorales sobre células humanas de cáncer de cuello uterino

GASTIAZORO MP; RACCA ME; ALMIRON A; MILESI MM; STASSI AF; RENNA S; ORTEGA H; VARAYOUD J

Congreso; 3er congreso argentino de cannabis y salud; 2024

El potencial anti-tumoral de los cannabinoides es un área de estudio en continuo desarrollo, con especial atención sobre procesos carcinogénicos clásicos como proliferación, apoptosis, vascularización e invasión de las células tumorales. Existe evidencia sobre los efectos de cannabis medicinal en modelos de cáncer de mama, pulmón, colon, y próstata. Sin embargo, poco se conoce acerca de la respuesta anti-tumoral en cáncer de cuello uterino (CCU). Nuestra hipótesis propone que el cannabis medicinal alto en cannabidiol (CBD) presenta propiedades anti-tumorales sobre células humanas de CCU, mediante mecanismos anti-proliferativos y pro-apoptóticos. Nos propusimos determinar la respuesta de una línea celular derivada de un adenocarcinoma cervical humano - células HeLa - frente al tratamiento con un aceite de cannabis alto en CBD, en relación a los procesos de proliferación y apoptosis. El aceite de cannabis medicinal ensayado fue provisto por el Laboratorio Industrial Farmacéutico de la Provincia de Santa Fe (LIF SE). Dicho aceite 10 % p/p CBD no contiene otros cannabinoides y cumple con los estándares de calidad. Células HeLa fueron cultivadas en medio de cultivo Eagle modificado de Dulbecco suplementado con 10% de suero fetal bovino y 1% de antibiótico/antimicótico y se mantuvieron en estufa de cultivo a 37 °C, con 5% de CO2 y 95% de humedad. Diferentes concentraciones de CBD fueron ensayadas: CBD1: 1 µM; CBD10: 10 µM CBD100: 100 µM CBD1000: 1000 µM, además de un control negativo solo con el vehículo (etanol). Luego de 24 horas de tratamiento, evaluamos los efectos inducidos sobre la proliferación celular utilizando el ensayo colorimétrico WST-1. Además, evaluamos los efectos sobre la inducción de muerte celular mediante un kit comercial (FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit, BD Pharmigen), que permite evaluar muerte celular por apoptosis y/o necrosis mediante citometría de flujo. Análisis de datos: programa estadístico SPSS utilizando el test estadístico ANOVA. Observamos que el tratamiento con CBD1000 redujo hasta un 50% la proliferación celular, y en un 10% con CBD100. CBD1 y 10 no mostraron cambios significativos respecto al control. Estos resultados fueron acompañados de una inducción de la apoptosis celular de manera dosis dependiente (mostrado con mayor porcentaje de células Anexina+/ IP+). La condición basal expresó una viabilidad del 90% y An+/ IP+: 4,3%; CBD100 67,9% de viabilidad y 14,75% An+/ IP+ y CBD1000: 25,6% de viabilidad y 60% An+/ IP+. Además, CBD1000 mostró inducción de necrosis (5,71% en relación al basal 0,81%). CBD 1 y 10 no mostraron diferencias con el basal. Los resultados obtenidos muestran los efectos anti-tumorales de un aceite alto en CBD, a través de la disminución de la proliferación celular junto a una inducción de muerte celular por apoptosis de manera dosis dependiente, en una línea celular humana de CCU.