La Resistencia a la terapia con cisplatino incrementa las propiedades pluripotenciales del cáncer de pulmón no microcítico.

ANDRES BECHIS; AGUSTINA TARUSELLI; LIZETH ARIZA BAREÑO; MARIA J. COSTA; DAMIAN DELBART; ALEJANDRO J. URTREGER; LAURA B. TODARO

Cdad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; XXXIV Jornadas de Oncología; 2019

Instituto de Oncologia "A. H. Roffo"

El cáncer de pulmón no microcítico (NSCLC) es el subtipo más frecuente en el mundo. Actualmente, el tratamiento con cisplatino es la terapia estándar para esta patología, a pesar de que resulta frecuente la adquisición de resistencia, generalmente asociada a la presencia de células madre tumorales (CSC). En este sentido, el Sistema del Ácido Retinoico, entre otros, ha sido implicado en el mantenimiento de dichas CSC, convirtiéndolo en un posible blanco terapéutico para esta subpoblación. Nuestro objetivo fue evaluar la participación del ácido trans-retinoico (ATRA) en la modulación del crecimiento en un contexto de quimioresistencia tanto en líneas celulares humanas de NSCLC, como dentro de su población CSC. Para ello, nuestro grupo de trabajo ha desarrollado una variante resistente a cisplatino de la línea celular humana de NSCLC A549 (A549cpr). Las monocapas de las líneas A549 parentales y resistentes a cisplatino fueron tratadas con ATRA (0,3-70 uM) y/o cisplatino por 72 hs. Hemos observado que, si bien el tratamiento con cisplatino inhibió el crecimiento celular, el tratamiento con ATRA solo o en combinación, no modificó este parámetro. En este sentido, explorando la expresión de los principales Receptores Retinoicos, hemos evidenciado que, si bien se expresan todos los isotipos, en A549cpr el receptor RARb, involucrado en diferenciación celular, presentó menor nivel de expresión. Sin embargo, tanto en A549 como en A549cpr el tratamiento con 1µM de ATRA generó un aumento en la expresión de RARb, dando cuenta que el Sistema Retinoico está activo. Finalmente, estudiamos el componente progenitor de las líneas celulares A549 y A549cpr a través de cultivos de oncoesferas. A pesar de no observar diferencias entre ambas líneas celulares en su capacidad de formación de oncoesferas, las derivadas de A549cpr resultaron de mayor tamaño. Este fenómeno se vio acompañado por un aumento en la expresión del ARNm de Nanog, involucrado en pluritencialidad celular. En todos los casos, la expresión del ARNm de Nanog resultó mayor en las oncoesferas que en las monocapas respectivas. En conjunto, nuestros resultados refuerzan la hipótesis de que la resistencia a cisplatino puede estar mediada por un incremento en la renovación de CSC. Estos hallazgos nos llevan a proponer diferentes terapias de combinación dirigidas contra esta subpoblación celular, como podría ser la utilización del ATRA para favorecer su diferenciación y sensibilización frente a la terapia con cisplatino.El cáncer de pulmón no microcítico (NSCLC) es el subtipo más frecuente en el mundo. Actualmente, el tratamiento con cisplatino es la terapia estándar para esta patología, a pesar de que resulta frecuente la adquisición de resistencia, generalmente asociada a la presencia de células madre tumorales (CSC). En este sentido, el Sistema del Ácido Retinoico, entre otros, ha sido implicado en el mantenimiento de dichas CSC, convirtiéndolo en un posible blanco terapéutico para esta subpoblación. Nuestro objetivo fue evaluar la participación del ácido trans-retinoico (ATRA) en la modulación del crecimiento en un contexto de quimioresistencia tanto en líneas celulares humanas de NSCLC, como dentro de su población CSC. Para ello, nuestro grupo de trabajo ha desarrollado una variante resistente a cisplatino de la línea celular humana de NSCLC A549 (A549cpr). Las monocapas de las líneas A549 parentales y resistentes a cisplatino fueron tratadas con ATRA (0,3-70 uM) y/o cisplatino por 72 hs. Hemos observado que, si bien el tratamiento con cisplatino inhibió el crecimiento celular, el tratamiento con ATRA solo o en combinación, no modificó este parámetro. En este sentido, explorando la expresión de los principales Receptores Retinoicos, hemos evidenciado que, si bien se expresan todos los isotipos, en A549cpr el receptor RARb, involucrado en diferenciación celular, presentó menor nivel de expresión. Sin embargo, tanto en A549 como en A549cpr el tratamiento con 1µM de ATRA generó un aumento en la expresión de RARb, dando cuenta que el Sistema Retinoico está activo. Finalmente, estudiamos el componente progenitor de las líneas celulares A549 y A549cpr a través de cultivos de oncoesferas. A pesar de no observar diferencias entre ambas líneas celulares en su capacidad de formación de oncoesferas, las derivadas de A549cpr resultaron de mayor tamaño. Este fenómeno se vio acompañado por un aumento en la expresión del ARNm de Nanog, involucrado en pluritencialidad celular. En todos los casos, la expresión del ARNm de Nanog resultó mayor en las oncoesferas que en las monocapas respectivas. En conjunto, nuestros resultados refuerzan la hipótesis de que la resistencia a cisplatino puede estar mediada por un incremento en la renovación de CSC. Estos hallazgos nos llevan a proponer diferentes terapias de combinación dirigidas contra esta subpoblación celular, como podría ser la utilización del ATRA para favorecer su diferenciación y sensibilización frente a la terapia con cisplatino.