Efecto del tratamiento con ácido retinoico (ATRA) sobre el crecimiento y la progresión tumoral de células humanas tumorales mamarias que sobreexpresan la proteína kinasa C alfa (PKCa)

MARIA I. DIAZ BESSONE; LAURA B. TODARO; ALEJANDRO J. URTREGER

Cdad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; XXXII Jornadas de Oncología; 2017

Instituto de Oncologia "A. H. Roffo"

Objetivos: Las enzimas PKC constituyen una familia serina-treonina quinasa la cual controla numerosas funciones celulares, como el crecimiento, apoptosis y transformación maligna, mientras que el sistema retinoide está involucrado en la diferenciación celular. En el presente trabajo estudiamos el efecto del tratamiento retinoide sobre características asociadas a la progresión tumoral en las líneas MDA-M8231 y T47D con sobreexpresión de PKCa, (T47D-PKCa, MDA-MB231-PKCa respectivamente).Resultados: La sobreexpresión de PKCa no alteró la capacidad proliferativa in vitro de ambas líneas celulares. ATRA disminuye significativamente la capacidad proliferativa de las células T47D-PKCa mientras que las MDA-MB231-PKCa no responden al tratamiento retinoide. El análisis del ciclo celular por citometría de flujo demostró que ATRA induce el arresto en fase G1 solamente en las T47D-PKCa. Luego, analizamos la funcionalidad del Elemento de Respuesta a Ácido Retinoico (RARE) a través de un ensayo de genes reporteros. Ambas sublíneas aumentan la actividad de RARE. Por otro lado, evaluamos los sitios AP1 dado que los retinoides están involucrados en trans-represión de dicho elemento. A pesar de que en las T47D-PKCa la actividad de AP1 disminuyó durante el tratamiento con ATRA. No se observó dicho efecto en MDA-MB231-PKCa. Mediante RT-qPCR analizamos la expresión de los receptores retinoides en la líneas MDA-MB231 y T47D. MDA- MB231 fue incapaz de incrementar los niveles de RARb; y RARg; en respuesta al tratamiento retinoide como si se observó en las células T47D. Como la represión de sitios AP1 inducido por ATRA ha sido atribuido a RARb; sobreexpresamos dicho receptor en las células MDA-MB231. Como resultado de esto observamos una clara trans-represión de los sitios AP1 luego del tratamiento con ATRA.Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que PKCa sensibiliza a las células T47D al tratamiento con retinoides, lo cual correlaciona con observaciones previas en líneas murinas. Por otro lado, la alta de respuesta al tratamiento retinoide de MDA-MB231 puede deberse a la incapacidad de transreprimir los sitios AP1, dado por la falta de la expresión de los receptores RARb.