El tratamiento combinado con acido retinoico y lapatinib, disminuye el crecimiento y la clonogenicidad de las células stem/progenitoras de de un adenocarcinoma mamario murino triple negativo

AGUSTINA TARUSELLI; DAMIAN E. BERARDI; ALEJANDRO J. URTREGER; LAURA B. TODARO

Congreso; XXXI Jornadas de Oncología; 2016

Instituto de Oncologia "A. H. Roffo"

Las células stem tumorales (CSC) presentan resistencia tanto a la quimioterapia como a la radiación y son consideradas semilla de la metástasis. Trabajos recientes determinaron que el receptor HER2 sería fundamental para el mantenimiento de las CSC, por tal motivo en este trabajo nos propusimos: A) evaluar la presencia de este receptor tanto en la línea tumoral mamaria 4T1 como en su población CSC; B) Analizar la modulación del crecimiento por el tratamiento retinoide con ATRA y su combinación con Lapatinib.Mediante Western blot pudimos determinar que HER2 se expresa selectivamente en la población CSC y además se encuentra en su forma activa (fosforilada).Estudiamos el efecto del tratamiento con ATRA (1uM), Lapatinib (1uM) y la combinación de ambas drogas sobre el crecimiento celular durante 96 hs. La presencia de Lapatinib provocó una marcada disminución de la capacidad proliferativa a partir de las 72 hs en las monocapas de células 4T1, evaluado por recuento directo. Los mismos tratamientos fueron aplicados sobre cultivos de mamosferas ya establecidos observando que la combinación de ATRA con Lapatinib disminuye fuertemente la formación de las mismas, siendo muy pequeñas e irregulares, evidenciándose además la presencia de numerosas células muertas. Asimismo hemos cuantificado los diámetros promedio en cada tratamiento como parámetro de crecimiento de CSC (diámetro en μm: Control 150±8; Lp120±22; ATRA 93±16; ATRA/Lp 72±19).Células provenientes de mamosferas pretratadas fueron sembradas en baja densidad con el fin de determinar su capacidad clonogénica. Pudimos observar que si bien el ATRA y el Lapatinib disminuyen la capacidad clonogénica de las CSC, el efecto del tratamiento combinado es significativamente mayor que cada tratamiento por separado (número de colonias: C 241±19; Lp 142±14; ATRA 202±6; ATRA/Lp 65±5)El tratamiento con Lapatinib, conjuntamente con la inducción de la diferenciación ejercida por los retinoides potenciarían la disminución del crecimiento del componente CSC de un tumor de mama triple negativo; lo cual abriría una nueva propuesta terapéutica para este subgrupo de tumores de difícil tratamiento actualmente.