INVESTIGADORES
URTREGER Alejandro Jorge
congresos y reuniones científicas
Título:
Rol del sistema retinoide y la actividad de la proteína quinasa C (PKC) en la supervivencia, propagación y diferenciación de células stem/progenitoras del adenocarcinoma mamario murino LM38-LP
Autor/es:
DAMIAN E. BERARDI; CAROLINA FLUMIAN; MARIA I. DIAZ BESSONE; STÉFANO M. CIRIGLIANO; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER; LAURA B. TODARO
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; 57° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
Se hipotetiza que las células stem tumorales son responsables de la quimioresistencia y el fenotipo metastásico de numerosos tumores mamarios. En el presente trabajo, se utilizaron mamoesferas (cultivos 3D enriquecidos en células stem/progenitoras provenientes de la línea LM38-LP). Estudiamos: A)- El perfil de expresión de genes pluripotenciales y la capacidad de regenerar el tumor parental y B)- La capacidad de las células de las mamoesferas para generar monocapas, cultivos 3D y mamoesferas secundarias, frente al tratamiento con retinoides (ATRA 1µM) y/o inhibidores de PKCa/d (Gö6976 2,5uM /Rottlerina 1uM). Por RT-PCR determinamos que las mamosferas expresan altos niveles de Nanog, Sox2, C-Myc y p16 respecto de la línea original y son capaces de regenerar el tumor M38 in vivo. El tratamiento de las mamosferas con ATRA y/o Gö6976 produjo retardo del crecimiento (Diámetro a las 96 hs: Control: 200±63 um vs ATRA/Gö6976: 100±25 um). El tratamiento con Rottlerina no indujo cambios. El pre-tratamiento de las mamosferas con ATRA/inhibidor de PKC afecto la capacidad de formar mamosferas secundarias (% respecto del control: Gö6976: 14,81%; Rottlerina y ATRA: 75,3%, ATRA+Gö6976: 0% y ATRA+Rottlerina: 40,7%). Asimismo estas células regeneraron monocapas con distinta eficiencia (% de confluencia respecto del control luego de 10 días de cultivo: Gö6976: 5,5, Rottlerina: 77%, ATRA: 77%, ATRA+Gö6976: 5,5%, ATRA+Rottlerina: 55%). Además, mostraron distintas morfologías en cultivo en 3D en matrigel donde la presencia de ATRA indujo la formación de lumen, el tratamiento con Gö6976 evidencio estructuras pequeñas con señales apoptoticas, mientras que el tratamiento con Rottlerina mostró estructuras irregulares de mayor tamaño. Nuestros resultados confirman que la línea LM38-LP presenta células pluripoteniciales y que la inhibición de la actividad de PKCa conjuntamente con el tratamiento diferenciador retinoide conduciría a la reducción de esta población celular.