El tratamiento con la forma trans del ácido retinoico (ATRA) modula la expresión de las isoformas alfa (a) y delta (d) de la proteína quinasa C (PKC) en líneas mamarias murinas y humanas normales y tumorales

LAURA B. TODARO; MARÍA LAURA POLO; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER

Mar del Plata

Congreso; 53° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Se ha postulado que los retinoides ejercen algunos de sus efectos sobre la diferenciación celular y la reversión del fenotipo maligno a través de interacciones con isoformas de PKC, disminuyendo principalmente PKCa (asociada a proliferación) y aumentando PKCd (asociada a diferenciación). Para determinar de que manera el crosstalk entre ambas vías es capaz de regular la progresión maligna de células mamarias, nos propusimos analizar en esta primera etapa, si el tratamiento con ATRA es capaz de modular la expresión estas isoformas de PKC como así también si la activación de las PKC por PMA es capaz de modificar la expresión de los receptores retinonideos. Utilizamos las líneas murinas LM3 (tumoral) y NMuMG (normal) y la línea tumoral humana MDA-MB231. Por RT-PCR determinamos que el tratamiento con PMA indujo una marcada disminución en la expresión de todos los receptores retinoides RAR en los modelos murinos (65±15%), mientras que en las células humanas se observó el efecto inverso (aumento: 80±25%). Mediante Western blot y densitometría, determinamos que el tratamiento con ATRA (1uM, 6h) de las células LM3, indujo una reducción en los niveles de expresión de PKCa (40±14%) y un aumento en PKCd (60±17%), así como también un incremento de 4 veces en los niveles de pAkt (en todos los casos p<0,05 n=3). En éstas, el ATRA no moduló la proliferación medida por MTS a los 2, 4 y 6 días mostrando solamente un incremento en el tamaño celular. Las células NMuMG, respondieron al ATRA, aumentando la expresión de ambas isoformas de PKC (~3 veces, p<0,05 n=3), y los niveles de pAkt (~2 veces, p<0,05 n=3). Por otro lado en la línea MDA-MB231, el ATRA redujo la expresión de PKCa y PKCd (40±5% y 48±7% resp p<0,05 n=3) sin alterar los niveles de pAkt. Estos resultados indican que la activación la PKC es capaz de modular la expresión de receptores retinoideos involucrados en diferenciación/crecimiento, como así también que el tratamiento con ATRA modula los niveles de distintas PKCs.