La sobreexpresion de la isoforma d de PKC incrementa la capacidad proliferativa y la resistencia a la apoptosis de células mamarias murinas normales

VALERIA C. GROSSONI; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER

Buenos Aires

Congreso; XXI Jornadas Multidisciplinarias de Oncología; 2005

Instituto de Oncología "A. H. Roffo"

Las PKCs constituyen una familia de serino-treonina quinasas que intervienen en procesos de señalización intracelular cuya desregulación se ha asociado con la transformación maligna y la progresión tumoral. La isoforma d se clasifica como novel ya que es activada por diacilglicerol (DAG) pero no por calcio. Anteriormente se transfectó en forma estable la línea NMuMG con PKCd observándose, entre otras características, un incremento en la capacidad adhesiva y proliferativa. En este trabajo nos propusimos determinar que vías de señalización se ven alteradas por la sobreexpresión de PKCd y cual es su efecto en un contexto de células mamarias murinas normales. El tratamiento con ésteres de forbol (activadores de PKC clásicas y noveles) indujo un incremento aun más notable en la proliferación el cual está acompañado de un incremento en la activación de la vía ERK/MAPK y un aumento en los niveles de expresión de la ciclina D1. Asimismo, las células PKCd fueron más resistentes a la apoptosis inducida por privación de suero o doxorubicina (Dox) que las células control (incremento: 25% a 50% respecto a células control, p<0.05). El tratamiento con inhibidores farmacológicos de MEK/ERK (PD98059) y PI3K/Akt (LY94002) nos permitió determinar que la vía de Akt es la responsable de la mayor resistencia a la muerte celular inducida por Dox en las células NMuMG-PKCd. Ensayos de Western blot, permitieron establecer que este efecto es dependiente de los niveles de p-Akt. Además la sobreexpresión de PKCd se asoció con la reducción en los niveles de Bax y Caspasa 9, moléculas altamente asociadas a la inducción del proceso apoptótico.  Los resultados aquí presentados indican que PKCd controla el crecimiento y la resistencia a la muerte celular mediante dos vías de señalización independientes (MEK/ERK y PI3K/Akt respectivamente) y sugieren que la isoforma d de PKC podría ser considerada como un potencial blanco molecular para un tratamiento más racional del cáncer de mama.