INVESTIGADORES
URTREGER Alejandro Jorge
congresos y reuniones científicas
Título:
La sobreexpresión de PKC delta en la línea de carcinoma ductal pancreático humana (panc1) induce un comportamiento tumoral mas agresivo
Autor/es:
LAURA V. MAURO; VALERIA C. GROSSONI; ALEJANDRO J. URTREGER; LUCAS L. COLOMBO; CHENFENG YANG; MARCELO G. KAZANIETZ; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; LYDIA I. PURICELLI
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; 51° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
La desregulación de las quinasas PKC, receptores de los esteres de forbol, se asocia a progresión tumoral. Su rol en la patogénesis del carcinoma pancreático, de pobre pronóstico y resistente a la terapia convencional, es poco conocido. Nuestro objetivo fue estudiar el efecto de la sobreexpresión de la isoforma novel PKC delta (PKCd) en algunas propiedades in vitro e in vivo de la línea de carcinoma ductal pancreático humana (PANC-1). Células transfectadas con el vector vacío pMTH se utilizaron como control. Por Western blot se determinó que las células PANC-1 expresan constitutivamente bajos niveles de PKCd. Los clones transfectados en forma estable mostraron altos niveles de la quinasa, obteniéndose la línea PANC-PKCd. Se comprobó que la PKCd transfectada es funcionalmente activa ya que su estimulación con PMA, provocó el aumento de la fosforilación de la molécula ERK, regulada por PKC. Mediante experimentos in vivo en ratones nude (n=10) se vio que los tumores originados de PANC-PKCd tienen un tiempo de latencia menor (Md= 36,5 d, rango: 31-53) vs pMTH (Md= 66 d, 66-73, p< 0,05) y un aumento significativo de su tasa de crecimiento. Por ínmunohistoquímica contra Ki67 se vio que los tumores de PANC-PKCd fueron más proliferatívos que los originados de células control. In vitro, la sobreexpresión de PKCd provocó un aumento en el n° de colonias en agar blando (PANC-PKCd= 11,7±1,2 vs pMTH= 8,0±1,0 colonias/placa 24). Sin embargo, las PANC-PKCd no mostraron diferencias en la tasa de crecimiento en monocapa con respecto al control. Además, las PANC-PKCd mostraron ser 4,3 veces más resistentes que las control al tratamiento con doxorrubícina (6 uM) y a la muerte por deprivación de suero. Los resultados demuestran que la sobreexpresión de PKCd en las células tumorales pancreáticas humanas induce tumores más agresivos, comportamiento que podría asociarse a su mayor capacidad de proliferación en forma independiente del anclaje y a la mayor resistencia a condiciones de stress.