El tratamiento con un derivado de la vitamina A (ATRA) modula la expresión y localización subcelular de la isoforma delta de la proteína quinasa C (PKC) en células mamarias murinas

DAMIAN E. BERARDI; MARÍA INÉS DÍAZ BESSONE; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER; LAURA B. TODARO

Mar del Plata

Congreso; 54° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Los retinoides ejercen algunos de sus efectos sobre la diferenciación celular y reversión del fenotipo maligno a través de interacciones con isoformas de PKC. En este trabajo nos propusimos: A) estudiar el rol del ATRA sobre el crecimiento de las líneas celulares mamarias murinas LM3 (tumoral) y NMuMG (normal). B) evaluar el efecto del tratamiento retinoideo sobre la expresión y distribución subcelular de la PKCd. C) Valorar la importancia de PKCd en la actividad de los receptores retinoideos. El tratamiento con ATRA (1uM, 72h) indujo la inhibición del crecimiento celular. Este fenómeno se asoció a una reducción en pERK (80±9% y 40±5% en LM3 y NMuMG resp.) y a un aumento en los niveles del inhibidor del ciclo celular p27 en fracción nuclear, sin alterar la expresión de Ciclina D1 en ambas líneas celulares. Por WB determinamos que el tratamiento con ATRA (72h) indujo un aumento en los niveles de PKCd tanto en núcleo (4 veces) como en citoplasma (2 veces) en la línea LM3. La línea NMuMG sólo mostró modulación citoplasmática (50±7% de reducción). En el caso de LM3 estos resultados fueron corroborados por inmunofluorescencia. El silenciamiento farmacológico de PKCd en LM3, impidió la activación de los receptores retinoideos por ATRA, evidenciado a través de un ensayo con un gen reportero (RARE-Luciferasa). Nuestros resultados indican que el tratamiento con ATRA inhibe el crecimiento de las células mamarias murinas. Además, el ATRA fue capaz de modular la expresión y localización subcelular de PKCd y el efecto del ATRA, ejercido a través de la activación de sus receptores nucleares, dependería al menos en parte de la traslocación al núcleo de esta isoforma de PKC.