INVESTIGADORES
URTREGER Alejandro Jorge
congresos y reuniones científicas
Título:
El efecto del tratamiento con un derivado de la vitamina A (ATRA) depende de la expresión y actividad de las distintas isoformas de la proteína quinasa C (PKC) en líneas mamarias murinas y humanas
Autor/es:
DAMIAN E. BERARDI; MARÍA INÉS DÍAZ BESSONE; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER; LAURA B. TODARO
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XXV Jornadas de Oncología; 2009
Institución organizadora:
Instituto de Oncología "Angel H. Roffo"
Resumen:
Los retinoides ejercen algunos de sus efectos sobre la diferenciación celular y la reversión del fenotipo maligno a través de interacciones con isoformas de PKC, disminuyendo PKCa (asociada a proliferación) y aumentando PKCd (asociada a diferenciación). Objetivos: determinar de qué manera el crosstalk entre ambas vías es capaz de regular la progresión maligna de células mamarias analizando si el tratamiento con ATRA modula la expresión/activación de isoformas de PKC y si la activación de PKC por PMA modifica la expresión de los receptores retinoideos. Utilizamos las líneas celulares murinas LM3 (tumoral) y NMuMG (normal) y la línea tumoral humana MDA-MB231.  El tratamiento con ATRA (1uM, 72 hs) indujo una importante inhibición del crecimiento celular. Este efecto se asoció a la reducción en los niveles de pERK y el incremento de pAKT, en células LM3 y NMuMG. También se observó un incremento en los niveles del inhibidor del ciclo celular p27 en el núcleo y no se observaron diferencias en la expresión de la Ciclina D1 en este compartimiento. La línea MDA-MB231 no mostró respuesta al efecto del ATRA.  Mediante Western blot determinamos que el tratamiento con ATRA (6 h) indujo en las células LM3 la reducción de la expresión de PKCa y el aumento de PKCd, mientras que las células NMuMG mostraron un aumento en ambas isoformas de PKC. Por otro lado en la línea MDA-MB231, el ATRA redujo la expresión de PKCa y d. En el caso de LM3, estos resultados fueron corroborados por inmunofluorescencia observándose también que la PKCd permanece en la membrana 15 min y luego se ubica en la región perinuclear.  Por RT-PCR determinamos que el tratamiento con PMA (50 nM) indujo una marcada disminución en la expresión de todos los receptores retinoides RAR en los modelos celulares murinos, mientras que en las células humanas se observó el efecto inverso. Finalmente, el silenciamiento farmacológico de PKCa y PKCd en LM3, impidió la activación de los receptores retinoideos por ATRA, evidenciado a través de un ensayo con un gen reportero (RARE-Luc). Nuestros resultados indican que la activación la PKC es capaz de modular la expresión de receptores retinoideos involucrados en diferenciación y/o crecimiento y que el tratamiento con ATRA modula los niveles de distintas PKCs en forma diferencial dependiendo del tipo y especie celular. Además el efecto genómico del ATRA, ejercido a través de la activación de sus receptores nucleares, dependería especialmente de la activación de PKCd.