El silenciamiento farmacológico de las isoformas a y d de la Proteina Quinasa C (PKC) potencian la inhibición del crecimiento ejercido por Retinoides (ATRA) en el adenocarcinoma mamario murino LM38-LP

DAMIAN E. BERARDI; PAOLA B. CAMPODÓNICO; MARIA I. DIAZ BESSONE; CAROLINA FLUMIAN; ELISA BAL DE KIER JOFFÉ; ALEJANDRO J. URTREGER; LAURA B. TODARO

Mar del Plata

Congreso; 56° Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

Los retinoides ejercen algunos de sus efectos sobre la diferenciación celular y la reversión del fenotipo maligno a través de interacciones con disitntas isoformas de PKC. Utilizamos como modelo la línea celular mamaria murina LM38-LP compuesta por células luminales (LEP) y mioepiteliales (MEP). En este trabajo nos propusimos analizar: 1) el efecto del tratamiento con ATRA en combinación con inhibidores de PKC sobre el crecimiento in vitro de la línea LM38-LP 2) la modulación del patrón de expresión de los receptores retinoides (RARs) por inhibición de PKCs y la modulación de la expresión de las isoformas a y d de PKC por el tratamiento retinoide. Las monocapas fueron tratadas por 96hs con inhibidores de PKC: Gö6976 5uM (inhibidor de PKCa) o Rottlerina 1uM (Inhibidor de PKCd) y en presencia de ATRA (1uM), observándose una disminución de la tasa de duplicación celular respecto del control (N° celx105: control 22±1,1; Gö6976 3,6±0,6; Rottlerina 9+0,1; ATRA 11±0,1 ATRA/Gö6976 2,3±0,03; ATRA/Rottlerina 6,7±1,3). Siendo la combinación ATRA/Gö6976 la más efectiva, cuya significancia se dio a partir de las 72 hs. El tratamiento retinoide en células LM38-LP aumenta sólo los niveles de RARb2. Por RT-PCR determinamos que la inhibición de PKCa o d incrementa los niveles de RARa y RARg (este último involucrado en proliferación). La inhibición de PKCa o d combinada con ATRA genera un patrón de receptores retinoides compatible con la disminución de la proliferación y diferenciación (aumento de RARb2 y disminución de RARg. En la línea LM38-LP el tratamiento por ATRA (24 hs) induce el aumento de la expresión de PKCd y la disminución de PKCa (Western blot). En su conjunto estos resultados sugieren que el tratamiento retinoide potencia el efecto citostático cuando ambas isoformas de PKC están inhibidas, no sólo porque conduce a una disminución del crecimiento sino porque este efecto está acompañado de la modulación negativa de RARg.