Evaluación de la utilidad del tratamiento retinoideo en la reversión del fenotipo maligno de tumores mamarios con alteraciones en la expresión de distintas isoformas de la Proteína Quinasa C (PKC)

MARIA I. DIAZ BESSONE; DAMIAN E. BERARDI; PAOLA B. CAMPODÓNICO; ELISA BAL DE KIER JOFFÉ; LAURA B. TODARO; ALEJANDRO J. URTREGER

Buenos Aires

Congreso; XXVII Jornadas de Oncología; 2011

Instituto de Oncología "Angel H. Roffo"

Se han identificado múltiples vías de señalización comprometidas con la progresión del cáncer de mama como prometedores blancos terapéuticos, entre ellas encontramos a la vía de la PKC, implicada en proliferación y apoptosis y el sistema retinoideo involucrado en diferenciación. En este trabajo desarrollamos a partir del adenocarcinoma mamario murino LM3, un modelo de células que sobreexpresan PKCa o PKCd, con el fin de estudiar si estas sublineas modificadas genéticamente son más sensibles a los tratamientos retinoides (ATRA). El efecto del ATRA se estudió in vivo e in vitro, evaluando respuestas biológicas relacionadas al crecimiento tumoral y la diseminación metastásica. Dada la interacción existente entre la vía PKC y el sistema retinoide (resultados de nuestro grupo de trabajo), se estudio en primera instancia si la sobreexpresión de las isoformas a y d de PKC modifica la actividad de los sitios respondedores al Acido Retinoico (RARE). A través de un ensayo de genes reporteros (RARE-Luciferasa) demostramos que la sobreexpresión de PKCd incrementó la actividad constitutiva de estos sitios, siendo su actividad similar a la alcanzada por las células LM3-control y LM3-PKCa bajo el estímulo del tratamiento con ATRA. Este resultado se correlaciona con trabajos previos, que demuestran que PKCd viaja al núcleo junto con los receptores retinoideos, mientras que PKCa no tiene injerencia directa sobre la maquinaria transcripcional de genes modulados por ATRA. Sólo la sobreexpresión de PKCa fue capaz de reducir el tiempo de duplicación poblacional (TDP) in vitro respecto a las células LM3-control (TDP: 14,8+2,3 h vs 21,2+3,1 h). Además, estas células fueron las únicas que respondieron al tratamiento retinoide con un importante retardo de la proliferación. Este efecto no se observó en las células LM3-PKCd ni LM3-control. En relación a características relacionadas con la diseminación metastásica, observamos que LM3-PKCa presento mayor capacidad migratoria, revertida por el tratamiento retinoide (migración: 69,3+8,3% vs 41,2+5,1% en cel. control). Con el fin de determinar si los parámetros analizados in vitro tienen un correlato in vivo se inocularon las distintas líneas celulares en ratones BALB/c. Nuevamente, sólo la sobreexpresión de PKCa indujo la formación de tumores que, comparados con las células control, mostraron una mayor velocidad de crecimiento y elevado potencial metastático. El tratamiento con ATRA sólo fue capaz de limitar la progresión maligna en los tumores generados por las células LM3-PKCa (N° de nódulos metastásicos Md [Rango]: 9 [0-27] vs 55 [20-75] para LM3-PKCa tratadas y sin tratar respectivamente). Nuestros resultados sugieren que las distintas isoformas de PKC inducen efectos claramente diferenciables. Por un lado, la sobreexpresión de PKCa, confiere un fenotipo más agresivo pero a la vez torna a las células sensibles a los efectos biológicos del ATRA, mientras que elevados niveles de PKCd no alterarían la respuesta al retinoide. En conclusión, el uso de retinoides podría beneficiar a pacientes con tumores mamarios agresivos, producto de la expresión de altos niveles de PKCa.