Efecto del péptido sintético CIGB-300 en la modulación de vías de señalización involucradas con la progresión maligna de tumores de pulmón humanos y murinos

STÉFANO M. CIRIGLIANO; MARÍA INÉS DÍAZ BESSONE; CAROLINA FLUMIAN; DAMIAN E. BERARDI; ELISA D. BAL DE KIER JOFFÉ; HERNÁN FARINA; LAURA B. TODARO; ALEJANDRO J. URTREGER

Buenos Aires

Congreso; XXVIII Jornadas de Oncología; 2012

Instituto de Oncología "A. H. Roffo"

La CK2 es una serina/treonina quinasa involucrada en crecimiento celular, supervivencia y apoptosis. El CIGB-300 es un péptido sintético capaz de unirse al dominio fosfoaceptor de múltiples sustratos de CK2 inhibiendo competitivamente su actividad. En este trabajo se estudió el efecto de CIGB-300 sobre vías de señalización implicadas en progresión tumoral, ciclo celular y apoptosis. Además se analizaron efectos biológicos asociados a diseminación metastásica, empleando como modelo experimental líneas celulares humanas y murinas de cáncer de pulmón. El péptido CIGB-300 presenta una dosis letal 50 (DL50) de 119±2,4 uM en células humanas H125 y 138,3±9,9 uM en las células murinas 3LL. Mediante microscopía de epifluorescencia con Annexina V pudimos determinar que el CIGB-300 induce muerte celular por apoptosis, obteniéndose niveles de marcación similares a los obtenidos con otros inductores conocidos (Etopósido, 10 uM). Ensayos de Western blot (WB) nos permitieron determinar los niveles nucleares y citoplasmáticos de componentes de las vías de Wnt y NFkB luego de los tratamientos con CIGB-300 ó TBB (inhibidor farmacológico caracterizado de CK2). En relación a la vía Wnt, observamos una importante disminución en los niveles de b-catenina nucleares, sitio al cual esta proteína se transloca a fin de regular la expresión de genes de supervivencia. La vía NFkB, también involucrada en sobrevida, presentó resultados similares observándose una disminución en los niveles de p65 nuclear sin alterarse los niveles citoplasmáticos de su inhibidor IkBa. Además, en forma concomitante con la inducción de muerte celular, se observó por WB la activación de caspasas, la disminución en los niveles de expresión del oncogén c-myc y de las ciclinas D1 y D2 en forma dependiente de la dosis. En relación a eventos asociados con la diseminación metastásica in vitro, se estudió la capacidad migratoria (ensayos wound healing) de las células 3LL y H125 tratadas o no con el péptido CIGB-300. Se observó una importante reducción en el potencial migratorio en forma dependiente de la dosis tanto para las células 3LL (reducción: 18,86±2,2% y 32.99±2,7% para 1/4 y 1/2 de la DL50 respectivamente) como para H125 (reducción: 31,73±20,08% y 51,12±28,8% para 1/4 y 1/2 de la DL50 respectivamente). Nuestros resultados indican que el tratamiento con el péptido CIGB-300, modula negativamente vías de señalización implicadas en progresión tumoral y diseminación metastásica, a la vez que queda de manifiesto su potencial proapoptótico. Si bien estos resultados son preliminares, esta droga podría constituir en el futro una nueva estrategia para el tratamiento del cáncer de pulmón, basada en el bloqueo de diferentes vías de transducción de señales en células pulmonares.