INVESTIGADORES
TARGOVNIK Hector Manuel
congresos y reuniones científicas
Título:
IMPLICANCIAS FUNCIONALES DE VARIANTES EN LA SECUENCIA EN EL GEN PAX8 IDENTIFICADAS EN PACIENTES CON DISGENESIA TIROIDEA.
Autor/es:
ESPERANTE, SEBASTIÁN ANDRÉS; CAPUTO, MARIELA; RIVOLTA, CARINA MARCELA; BARALLE, MARCO; TARGOVNIK , HÉCTOR MANUEL
Lugar:
Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; LII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Científica (SAIC); 2007
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Científica (SAIC)
Resumen:
Diez mutaciones con perdida de función en PAXB han sido descriptas en pacientes con Hipotiroidismo congénito debido a disgenesia tiroidea. En el presente trabajo se evalúa la implican­cia funcional de variantes en la secuencia identificadas por noso­tros en pacientes con disgenesia tiroidea y no observados en 500 alelos analizados de la población normal. En 60 pacientes no re­lacionados se identificaron una transición c.674C>T que resulta en una sustitución p.T225M, una transición c.699C> T que no cam­bia el aminoácido p.L233L y una transición c.1006G>A que re­sulta en una sustitución p.G336S. Se estudió la capacidad del factor de transcripción PAX8 salvaje y las mutantes p. T225M Y p.G336S de inducir la activación del promotor de tiroglobulina humana (pTG). Se cotransfectaron células HeLa con vectores de expresión PAXB y vectores con gen de luciferasa bajo el control del promotor de pTG. Por otro lado se construyeron minigenes de exones únicos y múltiples en el vector pTB para estudiar si los cambios en la secuencia tienen algún efecto en el procesamien­to de los exones. Se transfectaron células HeLa con los minigenes salvajes y mutados y se evaluó el procesamiento del ARNm por RT-PCR. La inducción de la expresión de luciferasa fué equiva­lente para PAXB salvaje y PAX8 mutado. Es decir p.T225M y p.G336S no afectan la capacidad de PAX8 de activar el promo­tor de pTG. Las variantes en la secuencia c.674C> T y c.699C> T no afectan el procesamiento del exón 7 en los minigenes construidos. La transición 1006 G>A aumenta la exclusión del exón 9 del ARNm, lo que alteraría el balance de las isoformas presentes en PAX8. Los resultados obtenidos permiten explicar un posible mecanismo patogénico de la variante en la secuencia 1006 G>A (G336S) no a nivel de la estructura-función de la pro­teína sino por la influencia sobre el procesamiento del exón 9.
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