INVESTIGADORES
SORDELLI Daniel Oscar
congresos y reuniones científicas
Título:
Medicina (B. Aires) 65 (supl. II):59, 2005.
Autor/es:
BARBAGELATA, MS; BUZZOLA, FR; LATTAR SM; TUCHSCHERR, LPN; ALVAREZ, LP; SORDELLI, DO
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; 50ª. Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica.; 2005
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigaci¨®n Cl¨ªnica
Resumen:
Las infecciones intramamarias (ima) causadas por esta bacteria tienden a volverse cr¨®nicas y las posibilidades de cura luego de una terapia con antibi¨®ticos es limitada. Diferentes tipos de vacunas han fracasado en prevenir y reducir la severidad de las mastitis por S. aureus. El uso de bacterias atenuadas por auxotrof¨ªa es una alternativa al desarrollo de vacunas que prevengan este tipo de infecciones. En el presente trabajo se caracteriz¨® gen¨¦tica y molecularmente la mutante aux¨®trofa de S. aureus (Sa306) obtenida por transposici¨®n y se evalu¨® la capacidad protectiva e inmunog¨¦nica en el modelo murino de mastitis. Mediante transducci¨®n con el fago phi-11, se traspas¨® a la cepa salvaje RN6390 de S. aureus la resistencia a eritromicina (EmR) que porta el transpos¨®n Tn917. M¨¢s de 100 transductantes mostraron ser EmR y presentaron el mismo fenotipo dependiente de los amino¨¢cidos arom¨¢ticos (aa aro) observado en la mutante Sa306. La secuenciaci¨®n de un fragmento del ADN flanqueante al transpos¨®n insertado revel¨® que el gen afectado fue aroA. Mediante el ensayo de complementaci¨®n con el pl¨¢smido pALC1743 que porta el gen aroA salvaje, la mutante Sa306 recuper¨® la capacidad de crecer en medio m¨ªnimo carentes de los aa aro confirmando que la lesi¨®n en aroA es responsable del fenotipo aux¨®trofo observado. Luego del desaf¨ªo ima con la cepa salvaje RN6390, las UFC recuperadas de gl¨¢ndula mamaria de los ratones aroA-inmunizados (1052¡À538 UFC totales) fue significativamente menor comparado con el grupo control (1,6x105¡À9,5x104 UFC totales, p=0,02) y con el grupo inmunizado con RN6390-muerto por calor (2,5x105¡À1,5x105 UFC totales, p=0,01; Test Mann-Whitney). La inmunizaci¨®n ima con la mutante aroA indujo altos niveles de los transcriptos IL-4 e IFN-¦Ã en las gl¨¢ndulas mamarias murina. Los resultados son promisorios respecto a la factibilidad de inducir inmunidad protectiva mediante la utilizaci¨®n de una vacuna viva atenuada aroA de S. aureus para prevenir la mastitis estafiloc¨®ccica.