La proteína A de Staphylococcus aureus contribuye al desarrollo de osteomielitis en un modelo experimental.

MENDOZA BERTELLI A; LATTAR SM; NOTO LLANA M; SORDELLI DO; DELPINO MV; SANJUAN N; GOMEZ MI

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

Las infecciones osteoarticulares poseen alta morbi-mortalidad siendo Staphylococcus aureus responsable de entre el 50% y el 70% de las osteomielitis en individuos adultos. Entre los multiples factores de virulencia de S. aureus, la proteíina A (SpA) ha sido identificada como inductora de las cascadas de señalizacion de TNF-α e IFN beta. La importancia de dichas vías de señalización en el metabolismo óseo, nos permitió hipotetizar que SpA podría contribuir a la patogenia de la osteomielitis por S. aureus. A fin de demostrar esta hipótesis, grupos de ratas adultas de la cepa Wistar fueron inoculadas bajo anestesia intramedularmente en la tibia izquierda con 2 x 106 UFC de S. aureus o una mutante isogénica que no expresa proteína A (spa-). A las 96 horas, 10 y 15 semanas post-desafio las ratas fueron sacrificadas.  Se cuantificaron las Unidades Formadoras de Colonias (UFC) recuperadas en hueso y se analizaron parámetros morfométricos (Indice Osteomielítico, I.O). En grupos inoculados en forma paralela se realizaron estudios histopatológicos. Se observó una reducción significativa en el tamaño de la lesión ósea en las ratas inoculadas con la mutante spa- respecto de las inoculadas con S. aureus a todos los tiempos estudiados (96 horas: p<0,01; 10 semanas: p<0,05; 15 semanas: p<0,01). Asimismo se observó una reducción significativa en el número de UFC a las 96 horas y 15 semanas post-desafío (96 horas: p< 0,01; 10 semanas: p=0,222; 15 semanas: p<0,001).  A las 15 semanas post-desafío se observó una correlación entre las UFC recuperadas y el I.O (r=0,96 p<0,0001). Dada la importancia de la actividad de las metaloproteinasas (MMPs) en la degradación ósea y por consecuente en las enfermedades osteoarticulares, se determinó la actividad de MMP-9 en los homogenatos de las tibias infectadas utilizando a las tibias sin inocular como control de actividad basal. Se observaron diferencias significativas en la actividad proteolítica de MMP-9 en ratas desafiadas con S. aureus respecto de la mutante spa- a las 10 semanas post-inoculación (p< 0,05). Paralelamente se realizaron análisis histológicos de las tibias a las 15 semanas post-desafío advirtiéndose la presencia de abscesos, con piocitos y leucocitos polimorfonucleares y escaso tejido de granulación, en las tibias inoculadas con S. aureus. En las tibias de las ratas infectadas con la mutante spa- el tejido de granulación fue proporcionalmente mayor que los abscesos. Se determinó la presencia de osteoclastos en cortes de tejido mediante la reacción enzimática de la fosfatasa acida tartrato resistente (TRAP). Se observó un mayor numero de osteoclastos (evidenciados por microscopia óptica como células multinucleadas positivas para TRAP) en las tibias desafiadas con S. aureus respecto a las inoculadas con la mutante spa-. Estos resultados en su conjunto sugieren un rol para la proteína A en el desarrollo de osteomielitis por S. aureus.