AHCYL1 como nuevo candidato en la regulación de la plasticidad celular tumoral pulmonar

MELINA MUÑOZ-BERNART ; A. CASTRO; J. M. ESPINOSA; N. BUDNIK; C. VIGLIANO; G. MOSTOSLAVSKY; MALENA MANZI; M. E. MONGE; C. PEREZ-CASTRO

Buenos Aires

Jornada; XXXIV Jornadas Multidisciplinarias 2019.Oncología Traslacional y Enfoque Multidisciplinario: desafíos actuales y futuros.; 2019

Hospital Angel H. Roffo - Facultad de Medicina - Universidad de Buenos Aires

El cáncer de pulmón es uno de los más frecuentes en la población e involucra la desregulación de genes involucrados en la plasticidad tumoral. Los tumores sólidos son heterogéneos y existe una subpoblación que tiene propiedades de células madre conocidas como células madre tumorales (CMT) que se cree que son responsables de la recurrencia de los tumores después del tratamiento. Los cultivos en 3D, crecidos en condiciones de stemness (crecimiento libres de anclaje y en medio sin suero) se encuentran enriquecidos en CMT. Previamente, se ha identificado el gen Ahcyl1 utilizando la herramienta bioinformática INSECT como un potencial regulador de plasticidad en esta subpoblación. El objetivo de nuestro trabajo es estudiar el rol de Ahcyl1 en procesos de plasticidad tumoral. Utilizando como modelo las líneas celulares A549 y H1299, se realizaron cultivos en 2D (monocapa) y 3D (esferas) y se comparó la expresión del gen a nivel de mRNA y proteína. Se observó que la expresión de Ahcyl1 se encuentra disminuida en cultivos 3D (stemness) en comparación con los niveles de expresión en formato 2D (cultivos diferenciados) (análisis estadístico t-test). Por otra parte, se realizaron ensayos de dilución limitante para calcular la potencia stem en cultivos 3D (ELDA: Extreme Limiting Dilution Analysis) de células control y células silenciadas para la expresión de Ahcyl1 en forma estable (mediante infección con shRNA independientes). Se observó que la ausencia de Ahcyl1 aumenta significativamente la capacidad stem en células de cáncer de pulmón con propiedades de célula madre (análisis estadístico one-way ANOVA). Para la significancia estadística se estableció un valor de corte de p=0.05. En base a nuestros resultados, concluimos que Ahcyl1 estaría vinculado a un fenotipo celular más diferenciado y podría tener un rol como modulador de la identidad de células madre tumorales. Un mejor entendimiento de su rol en plasticidad tumoral podría contribuir al desarrollo de nuevas estrategias para diagnóstico y terapia del cáncer de pulmón.