IDENTIFICACIÓN DE NUEVOS INHIBIDORES DE LA ENTRADA DEL VIRUS DEL DENGUE A TRAVÉS DE UN ENFOQUE BASADO EN LA ESTRUCTURA

GABRIELA A. FERNÁNDEZ; EMILSE S. LEAL; CLAUDIO N. CAVASOTTO; M. GABRIELA AUCAR; MARIELA BOLLINI

Potrero de los Funes, San Luis

Simposio; XXI Simposio Nacional de Química Orgánica; 2017

El dengue es un virus transmitido por mosquitos que en los últimos años se haconvertido en un importante problema de salud pública en todo el mundo. Actualmenteno existe una terapia antiviral específica para el tratamiento y la prevención de lainfección. La penetración del virus envuelto dentro de la célula esta mediada por suproteína de envoltura principal E y es el primer paso en el ciclo de replicación viral. Laestructura cristalina de E de DENV revela un bolsillo hidrofóbico ocupado por unamolécula de detergente N-octylglucoside OG La unión de moléculas pequeñasen el bolsillo hidrofóbico OG puede provocar cambios conformacionales queimpedirían completar la fusión, bloqueando la entrada del virus a la célula huésped eimpidiendo su propagación.El objetivo de este trabajo es identificar pequeñas moléculas que se unan albolsillo hidrofóbicoOG de E para inhibir la entrada del virus a la célula. Para tal fin serealizó un screening virtual (HTD) utilizando una biblioteca comercial de 110.000compuestos. Luego de un exhaustivo proceso de filtrado por sus propiedades ADMET yun análisis visual del modo de unión de estos ligandos a la proteína, se identificaron 23moléculas candidatas. Los compuestos fueron comprados o sintetizados y se evaluó lacapacidad de dichas moléculas de inhibir la entrada del virus a la célula. Cinco moléculaspresentaron actividad antiviral en el orden micromolar bajo. En particular, el compuesto 2(EC50= 3,1 M) mostró una marcada actividad antiviral con un buen índice terapéutico(>32) y selectividad frente a otros virus pertenecientes a la familia flaviviridae.Estudios de dinámica molecular indicaron que 2 presentafuertes interacciones con aminoácidos claves en el bolsillo hidrofóbicoOG de E que son cruciales para la fusión de la envoltura del viruscon la membrana del endosoma y para liberar el genoma viral en elcitoplasma de la célula infectada. Además, se determinó la solubilidadin vitro de los compuestos más activos a pH 2 (estómago), 6,4(intestino) y 7,4 (sangre), y la estabilidad química en PBS. Todos loscompuestos demostraron poseer adecuada estabilidad (>48 h), bajasolubilidad a pH 7,4 (entre 1-10 M) y moderada solubilidad a pH 6,4y 2,0 (entre 10-50 M).2En conclusión, se pudieron identificar nuevas moléculas con capacidad inhibitoriaen la etapa temprana de la infección viral. A partir de estos resultados se estableció unanueva plataforma para el desarrollo de nuevos y más potentes agentes antivirales contraeste importante patógeno humano.