RSUME estabiliza a HIF-2alfa a través de la inhibición funcional del supresor tumoral VHL

TEDESCO, L.; BONFIGLIO, J.J.; FUERTES, M.; BARONTINI, M.; SILBERSTEIN, S.; ANTICO ARCIUCH, V.G.; WU, Y.; RENNER, U.; STALLA, G.K.; ARZT, E.

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Los factores de transcripción inducibles por hipoxia (HIFs)son instrumentales en la respuesta a hipoxia celular. La estabilidadde las subunidades HIF-alfa es regulada, en normoxia,por el supresor tumoral von Hippel-Lindau (VHL), que media suubiquitinación y posterior degradación. Patologías asociadas aVHL se caracterizan por la desregulación de HIF produciendotumores altamente vascularizados. Previamente observamosque RSUME aumenta la estabilidad de HIF-1alfa y actividadde HIF-1, a través de VHL. Además, que RSUME se expresaen órganos sensibles al sindrome VHL. En este trabajodemostramos el efecto de RSUME sobre VHL, a través de laestabilidad de HIF-2alfa, clave en el sindrome VHL. Utilizandocélulas RCC-786-O, deficientes en VHL, demostramos porWestern Blot, que RSUME no tiene efecto sobre la estabilidadde HIF-2alfa, pero revierte la ubiquitinación y degradación deHIF-2alfa por expresión de VHL. Por Pull-down y co-inmunoprecipitacióndeterminamos que RSUME y VHL interaccionanfísicamente. Esto fue corroborado por microscopía confocal encélulas COS-7 transfectadas con RSUME. Luego estudiamossi el efecto de RSUME es a través del complejo VHL-RSUME.En células RCC-786-O, observamos que RSUME estabiliza aHIF-2alfa y que inhibe su interacción con VHL. En muestrasde Feocromocitomas y Hemangioblastomas determinamos expresiónproteica de RSUME. Finalmente, estudiamos el rol deRSUME en el desarrollo tumoral VHl-dependiente inyectandoratones nude con clones derivados de células RCC-786-O, queexpresan VHL junto al silenciamiento de RSUME o su control. Elsilenciamiento de RSUME produjo una reducción del crecimientotumoral (p