Efecto del estrés alcalino a nivel fisiológico y transcripcional en los ecotipos Gifu y MG20 de Lotus japonicus.

BAUBÍN M.F; ESCARAY F J; GARRIZ A; BORDENAVE C; CAMPESTRE P; ROCCO R.A.; SERNA GARCÍA E; CARRASCO P.;; RUIZ O.A.

Castellon de la Plana

Congreso; Reunion Anual SEFV; 2011

SEFV

En suelos alcalinos se ve afectada la disponibilidad de ciertos nutrientes causando la disminución del crecimiento de las plantas. La alcalinidad edáfica está dada por altas concentraciones de carbonatos (CO3-2) y bicarbonatos (HCO3-), habiéndose observado que algunas especies de interés agronómico presentan cierta tolerancia a este tipo de estrés. Entre las mismas se encuentran las leguminosas del genero Lotus. En el presente trabajo se utilizaron dos ecotipos (Gifu y MG20) de la especie modelo L. japonicus para evaluar el efecto de la alcalinidad. Plantas de ambos ecotipos de L. japonicus fueron cultivadas en condiciones óptimas de crecimiento e irrigadas con solución Hoagland 0,5 X con el agregado progresivo de NaHCO3 hasta alcanzar una concentración de 30 mM. Se observó una diferencia en el grado de tolerancia de los dos ecotipos,  ya que mientras el ecotipo MG20 no presentó síntomas y la totalidad de plantas lograron el estado reproductivo, el ecotipo Gifu manifestó marcados síntomas de estrés asociados a la alcalinidad (clorosis, marchitez y senescencia de hojas) desencadenando la muerte de las plantas. En base a estos resultados se analizó  la expresión génica del ecotipo MG20 bajo estrés en un diseño completamente aleatorizado con dos tratamientos (control y alcalino) y con 4 repeticiones cada uno. El control fue irrigado con solución nutritiva, mientras que para el alcalino se utilizó la misma solución más 10 mM de NaHCO3. Luego de 21 días de tratamiento el material fue cosechado y se realizó la extracción de RNA para la hibridación de microarreglos (Affymetrix). Se obtuvieron 97 probesets en hoja y 320 en raíz a un foldchange=0,5. Estos probesets fueron analizados mediante el programa Mapman y se seleccionaron 20 genes para raíz y 20 para hoja, algunos de los cuales se encuentran relacionados a genes de pared celular, metabolismo secundario, transportadores de metales, flavonoides y kinasas. Los genes de interés seleccionados del ecotipo MG20 están siendo validados por la técnica de RT-PCR a tiempo real.