Fragmentación del ADN en Botrytis cinerea (Pers.) por efecto del extracto acuoso de Larrea divaricata.

HAPON, M.V.; BOITEUX J.J.; LUCERO, G.; MONARDEZ, C; PIZZUOLO, P.

México

Congreso; XVII Congreso Internacional y XLII Congreso Nacional de la Sociedad Mexicana de Fitopatología; 2015

Sociedad Mexicana de Fitopatología

El extracto acuoso del vegetal Larrea divaricata (jarilla) es capaz de inhibir al hongo fitopatógeno Botrytis cinerea. El objetivo del trabajo fue evaluar la integridad del ADN de B. cinerea al ser tratado con extracto de L. divaricata y de su compuesto mayoritario el ácido nordihidroguayarético (NDGA). Para ello el hongo fue cultivado en el medio líquido Czapec Dox al cual se le adicionó alternativamente el extracto vegetal en la CI95(200 mg.mL-1) , NDGA (1mg.mL-1) y un testigo sin la incorporación de otros compuestos. Se realizaron 3 repeticiones biológicas de cada tratamiento. El micelio obtenido de cada tratamiento fue precipitado, enjuagado con PBS y posteriormente extraído su ADN (50mM Tris-HCl pH 7.2, 1% mercaptoeta¬nol y 3% de SDS). Luego el ADN fue tratado con SYBR gold (10%) y sembrado en gel de agarosa al 1,5%. Como resultado se observó un fracciona¬miento del ADN de B. cinerea ocasionado por el efecto del extracto vegetal de L. divaricata evidenciado por bandas definidas en el perfil de la corrida (ADN escalonado). Esto puede asociarse a un proceso de apoptosis celular del hongo. En tanto, no se observaron bandas definidas por el efecto de NDGA solo, lo cual fue asociado a necrosis. El efecto necrotizante de este compuesto en la matriz compleja del extracto vegetal probablemente resulte inhibido. Estos resultados permiten dilucidar en parte, el modo de acción a nivel celular de la sus¬tancia de origen natural estudiada, sobre B. cinerea