LOS GENES PROPONEN LOS CLONES DISPONEN? VARIABILIDAD INTRA-CLONAL EN EL PERFIL DE ANTOCIANINAS DE MALBEC

MUÑOZ, CJ; FANZONE, M; GOMEZ TALQUENCA, S; CHIALVA, CS; EICHLER, E; LIJAVETZKY, D

Mendoza

Congreso; XXXVII Congreso Mundial de la Vid y el Vino; 2014

Organización Internacional de la Vid y el Vino (OIV)

Los antocianos son metabolitos de gran importancia en viticultura y enología ya que son los pigmentos responsables de la coloración de la uva y el vino. Por otro lado, desempeñan un papel clave en la formación de pigmentos poliméricos responsables de la estabilidad del color en vinos de guarda. La biosíntesis de antocianinas ocurre a través de una larga cascada enzimática compartida con otros flavonoides, por lo que su regulación genética debe ser muy precisa. Esto es así, ya que que el perfil de antocianinas se utiliza como marcador bioquímico para diferenciar variedades, y estos perfiles pueden variar en función de cambios en la expresión de varios de los genes de la ruta de biosíntesis. Existen diversos trabajos reportando la comparación de los perfiles de antocianinas entre variedades de vid, pero poco se conoce sobre variabilidad en los perfiles entre clones de una misma variedad. El objetivo de este trabajo fue analizar el perfil de antocianinas de clones de vid de la variedad Malbec por cromatografía liquida de alta resolución (HPLC-DAD) e identificar la existencia de variabilidad entre ellos. Utilizamos una colección de 134 clones de Malbec que crecen en el mismo viñedo en Agrelo (Mendoza). La identidad genética de cada clon se confirmó mediante la utilización de nueve marcadores microsatélites. Con el fin de caracterizar cada uno de los 134 clones presentes en la colección se determinó su perfil de antocianinas por medio de análisis de HPLC-DAD y el resultado fue analizado por paquetes estadísticos multivariados y de agrupamiento. Complementariamente, se estudiaron los niveles de expresión de diversos genes estructurales de la ruta de biosíntesis de antocianinas y sus reguladores, mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qRT-PCR). Como resultado de nuestros estudios se logró diferenciar los 15 principales metabolitos, malvidina, petunidina, delfinidina, cianidina y peonidina en sus tres formas modificadas (glucosilada, cumarilada y acetilada). Una variación significativa fue identificada entre los perfiles de los clones, debido principalmente a las variaciones en las concetraciones de malvidina. Estos resultados nos permitieron agrupar los clones en 10 grupos de acuerdo a su perfil. Se seleccionaron los 2 grupos de clones que presentaron mayor contraste y se repitieron los análisis de HPLC-DAD durante dos temporadas adicionales, observándose resultados similares. Con estos dos grupos se realizaron los ensayos transcriptómicos que nos permitieron determinar que la expresión diferencial de los genes F3'5'H, OMT1 y AM2 estarían relacionados con la variación del contenido de malvidina. Este trabajo mostró la existencia de la variación de los perfiles de antocianinas entre clones de la misma variedad de la vid y la supuesta implicación de genes relacionados con la hidroxilación, metilación y el transporte de las antocianinas en la base de tal variación.