Desarrollo de un método analítico screening para determinación de compuestos de interés funcional en muestras de ajo sometidas a diferentes tratamientos

LOCATELLI, DANIELA; LUCERO, ANALÍA; PAULA BERTÓN; GONZÁLEZ, ROXANA; JORGELINA C. ALTAMIRANO; ALEJANDRA B. CAMARGO

Mar del Plata

Congreso; XXIX Congreso Argentino de Química; 2012

Asociación Química Argentina

El ajo es considerado un importante alimento con propiedades biológicas desde tiempos ancestrales las cuales han determinado que en las últimas décadas sea considerado un alimento funcional. Tal denominación está avalada por numerosas investigaciones científicas que dan cuenta de sus efectos benéficos para la salud asociadas al estudio de los componentes químicos responsables de las mismas. Los principales compuestos responsables de tales propiedades son los compuestos organoazufrados. La química de las especies de este grupo reviste un gran desafío puesto que son compuestos inestables y reactivos que sufren modificaciones durante todas las etapas de procesado hasta su consumo. Algunos de ellos tienen sus estándares analíticos disponibles en el mercado y otros es necesario proceder a su síntesis en el laboratorio, además existen métodos analíticos en los cuales se analizan cada uno de ellos agrupándolos por sus afinidades químicas, que ya han sido objeto de estudio de diversos trabajos de nuestro grupo. El nuevo objetivo que nos planteamos para el presente estudio fue lograr desarrollar un único método analítico que nos permitiera determinar varios analitos presentes en muestras de ajo tanto crudo como cocido. Para lo cual se realizaron dos diseños experimentales factoriales multivariados: 1) con el objetivo de evaluar la estabilidad de cada uno de los analitos bajo estudio y sus mezclas bajo diferentes temperaturas, tiempo y solventes y 2) para optimizar el proceso de extracción S-L de las muestras previo análisis de HPLC. Se procuró sintetizar vinilditiinas (isómeros que no se comercializan en el mercado) y por último se realizaron los ensayos tendientes a la validación del método analítico desarrollado. Resultados Estabilidad de compuestos organoazufrados: En el caso de la alicina, la variable que más influyó en su concentración fue la temperatura. Con respecto a otros factores como tiempo o solventes no se observaron cambios significativos en sus respuestas. Para los otros compuestos analizados, Dialil sulfuro, Dialil disulfuro y Dialil trisulfuro el solvente fue influyente en su conservación, poniéndose en evidencia mejores respuestas al detector empleando acetonitrilo y metanol. Optimización de la Extracción sólido-líquido: El análisis estadístico de los resultados obtenidos evidenció que la variable que más influyó en la concentración de Alicina, Dialil disulfuro y Dialil trisulfuro, fue el volumen de acetonitrilo. De manera que un volumen mayor de este solvente disminuye significativamente la respuesta de los estándares. Para el caso de Dialil sulfuro pudo notarse que ninguno de los factores evaluados, tiempo de ultrasonido, pausa o no pausa durante el sonicado, vórtex y volumen de acetonitrilo, impactó significativamente en su concentración. Para la optimización y de manera de logar una rápida extracción, se seleccionó el menor tiempo de ultrasonido ya que no tiene efectos significativos, en el rango utilizado, para ninguna de las respuestas optimizadas. El volumen de acetonitrilo óptimo fue de 1,10 ml. En cuanto a la validación de la técnica de extracción S-L, los datos obtenidos permitieron concluir que el método analítico es selectivo, ya que no se observaron interferencias significativas en el cromatograma resultante, y mediante el análisis por espectrofotometría UV pudo comprobarse que los espectros obtenidos corresponden a las estructuras químicas de los estándares bajo estudio. Se obtuvieron curvas de calibración de cada estándar en las cuales se pudo observar una fuerte asociación lineal entre las variables área y concentración lo cual hace posible cuantificar e interpolar al trabajar con concentraciones dentro del rango medido para cada estándar. Con respecto a la precisión del sistema, para un límite de aceptación de 90-110% y de acuerdo a los valores de variación porcentual obtenidos, podría decirse que el sistema es preciso excepto para 2-vinil-4H-1,3 ditiina para la cual el valor resultante fue mayor al tabulado para dicho límite. El porcentaje de recuperación resultante para cada estándar fue mayor al 100%. Esto pudo deberse a un efecto de concentración del solvente de extracción. En consideración a la sensibilidad del método, los límites de detección y de cuantificación obtenidos oscilaron entre 0,35 -7, 4 ppm y 1-20,2 ppm respectivamente. Resultando adecuados para la determinación de los analitos de interés en las muestras problema.