INVESTIGADORES
RODRIGUEZ TALOU Julian
congresos y reuniones científicas
Título:
Las hidrofobinas como proteínas de fusión para la recuperación in situ de proteína recombinante en cultivo de Pichia pastoris.
Autor/es:
CEREZO J; SMITH ME; RODRIGUEZ TALOU J.
Lugar:
San Miguel de Tucuman
Reunión:
Congreso; Saprobio 2018; 2018
Institución organizadora:
Saprobio
Resumen:
El objetivo del presente trabajo es presentar una estrategia integrada producción, purificación e inmovilización de un antígeno del virus del Dengue (VD) para el diseño de un kit diagnóstico. Para esto se expresó el dominio III consenso de la proteína E del VD fusionado a hidrofobinas para su purificación en sistemas de dos fases acuosas e inmovilización directa por adsorción del producto purificado en placas multiwell usadas normalmente en técnicas de ELISA. La estrategia integrada se mejoró por la remoción in situ de la proteína de fusión durante el proceso de cultivo de la levadura, Pichia pastoris. El Dominio III consenso ha sido descripto recientemente basándose en el DomIII de la proteína E de distintas variedades de cada serotipo de todo el mundo, la cual demostró capacidad de generar una respuesta inmune contra todos los serotipos, por lo que es candidata a ser un antígeno vacunal contra el virus del dengue. Las hidrofobinas son proteínas anfifílicas de entre 7,5 ? 10 kDa, producidas por hongos filamentosos. Se ha observado que las proteínas fusionadas a ellas cambian su grado de hidrofobicidad y pueden ser separadas fácilmente en sistemas de dos fases acuosas, principalmente en aquellos basados en surfactantes no-iónicos.