Expresión y purificación del Dominio III de la proteína de envoltura del virus del dengue de los cuatro serotipos y consenso, fusionados a hidrofobina en larvas de insecto.

CEREZO J; TARGOVNIK AM; LOPEZ MG; SMITH ME; MIRANDA MV; RODRIGUEZ TALOU J.

CABA

Congreso; JorFyBI 2017, XV Congreso Argentino y IV Congreso Latinoamericano de Farmacia y Bioquímica Industrial; 2017

SAFYBI

El dengue es una enfermedad viral transmitida por mosquitos del género Aedes. El virus del dengue pertenece a la familia Flaviviridae y presenta cuatro serotipos antigénicamente diferentes (DEN-1, DEN-2, DEN-3 y DEN-4). Es un virus de RNA simple cadena y su genoma codifica para una poliproteína que tras su clivado da origen a tres proteínas estructurales cápside (C), membrana (M) y envoltura (E); y a siete proteínas no estructurales. La proteína E posee tres dominios, el dominio III (DomIII) contiene múltiples epitopes neutralizantes que son serotipo-específicos, y carece de otros epitopes que desencadenan anticuerpos no neutralizantes de reactividad cruzada. Recientemente ha sido descripta una secuencia consenso del DomIII, basándose en el DomIII de la proteína E de distintas variedades de cada serotipo de todo el mundo, la cual demostró capacidad de generar una respuesta inmune contra todos los serotipos, por lo que es candidata a ser un antígeno vacunal contra el virus del dengue.Las hidrofobinas son proteínas anfifílicas de entre 7,5 ? 10 kDa, producidas por hongos filamentosos. Se ha observado que las proteínas fusionadas a ellas cambian su grado de hidrofobicidad y pueden ser separadas fácilmente en sistemas de dos fases acuosas, principalmente en aquellos basados en surfactantes no-iónicos. El objetivo de este trabajo fue expresar y purificar los diferentes DomIII de los cuatro serotipos y el consenso fusionados a hidrofobina en larvas de insecto Rachiplusia nu, con el fin último de desarrollar un kit diagnóstico.