Producción de un antígeno del virus del dengue en larvas de insecto para el desarrollo de un kit de diagnóstico de bajo costo.

SMITH E; TARGOVNIK AM; MIRANDA MV; RODRÍGUEZ TALOU J

Buenos Aires

Congreso; III Congreso Latinoamericano de Farmacia y Bioquímica Industrial.; 2015

El dengue es una enfermedad viral transmitida a los humanos por mosquitos del género Aedes. Sus presentaciones clínicas varían desde una fiebre indiferenciada hasta la fiebre por dengue y sus formas más severas, la fiebre hemorrágica por dengue/síndrome de shock por dengue. Dado que hasta el momento no existe una vacuna en el mercado ni tratamiento específico para la enfermedad es que un diagnóstico temprano es de vital importancia para el manejo de la enfermedad. El virus del dengue pertenece al género Flavivirus y su genoma codifica para tres proteínas estructurales. De ellas, la proteína de la envoltura es la más abundante e inmunogénica. Su dominio III (DomIII) contiene epitopes que generan anticuerpos serotipo específico siendo por esto un target interesante para el desarrollo de vacunas y reactivos de diagnóstico. Por otra parte, las hidrofobinas (HFB) son proteínas anfifílicas producidas por hongos filamentosos que debido a sus características fisicoquímicas han sido descriptas como eficientes tags para la purificación de proteínas recombinantes en sistemas de dos fases acuosas (ATPS) basados en surfactantes no iónicos. Además, permiten la inmovilización de los antígenos fusionados a ellas en soportes sólidos comúnmente empleados en kits de diagnóstico de manera eficiente y correctamente orientada. El objetivo de este trabajo fue la expresión y purificación de DomIII recombinante fusionado a HFB (rDomIIIHDB) para el desarrollo de un kit de diagnóstico para la detección de inmunoglobulinas anti-Dengue, utilizando el sistema baculovirus-larvas de insecto.