Una nueva estrategia para la recuperación in situ de antraquinonas en cultivos in vitro de raíces transformadas de Rubia tinctorum basada en el agregado de hexadecano y dodecano.

PERASSOLO M; RODRIGUEZ JM; CARDILLO AB; GIULIETTI AM; RODRIGUEZ TALOU J.

Simposio; XIII SIMPOSIO REDBIO ARGENTINA 2021 VIRTUAL; 2021

REDBIO

Las AQs se utilizan son metabolitos secundarios presentes en especies de la familia Rubiaceae. Además de ser empleados como colorantes, presentan numerosas actividades terapéuticas como: anti-tumorales antivirales, tratamiento de cólicos renales, antimicrobianos, hipotensivos y anti-leucémicos. Para la obtención de metabolitos secundarios de interés terapéutico, las plantas enteras pueden ser utilizadas como fuente de estos compuestos, siendo una estrategia de bajo costo, ya que su escalado se efectúa a través de las técnicas agronómicas convencionales, pero con un impacto ecológico negativo ya que resulta en una explotación de la fuente natural y se afecta la biodiversidad. Una alternativa a este sistema es la producción mediante cultivos in vitro vegetales, los cuales permiten la producción de biomoléculas de manera homogénea, bajo normas GMP y en condiciones optimizadas y controladas. En este trabajo se evaluó la producción de AQs en cultivo de raíces transformadas de Rubia tinctorum mediante la combinación de elicitación con metiljasmonato (MeJ) y la remoción in situ del producto (ISPR) con el agregado de una segunda fase orgánica al medio, hexadecano (HXD) y dodecano (DDC). Raíces transformadas se cultivaron en el medio de cultivo Lloyd & Mc Cown?s Woody Plant Medium (WPM). Se realizó un diseño factorial completo de 22 ; MeJa: 0 y 100 µM, HXD y DDC: 0 y 10%.El agregado de HXD estimuló la acumulación de AQs en el medio extracelular y mostró un efecto sinérgico con el MeJa. El DDC, por otra parte, si bien también demostró un efecto positivo en la acumulación extracelular de AQs también afectó el crecimiento de las raíces cuando se combinó con el agregado de MeJa. Los tratamientos individuales con HXD y DDC resultaron en una mayor liberación y acumulación de AQs en la fase orgánica comparadas con el control y con respecto al tratamiento con MeJa, siendo 35 veces superior para el caso del DDC y 3 veces para el HXD.En cuanto a la productividades de AQs los tratamientos con MeJa y MeJa/HXD mostraron los mejores resultados alcanzando niveles de AQs 1138 y 1742 µmol/l, respectivamente. El control y el tratamiento con MeJa/DDC en cambio resultaron en concentraciones de AQs de 571 µmol/l y 852 µmol/l respectivamente. Los tratamientos individuales con HXD y DDC fueron similares a los alcanzados en el por el cultivo control de 552 µmol/l y 582 µmol/l, respectivamente.En definitiva el agregado de HXD y DDC mostró ser una estrategia eficiente para la recuperación in situ del producto siendo el HXD el más eficiente, ya que el DDC mostró efectos negativos para el crecimiento y la producción cuando se combinó con la elicitación con MeJa